Oznaczanie wrażliwości na antybiotyki

Mikrobiologiczne posiewanie krwi w celu uzyskania sterylności pozwala mikroorganizmom na rozwój na specjalistycznych pożywkach (dla tlenowców i beztlenowców), a następnie ich identyfikację za pomocą spektrometru mas. Wrażliwość na antybiotyki ustala się metodą krążkowo-dyfuzyjną z uwzględnieniem zaleceń dotyczących antybiotykooporności patogenów na leki przeciwbakteryjne.

Kiedy zwykle przepisuje się posiew krwi na bezpłodność??

Zakażenie krwi lub posocznica może być powikłaniem miejscowego procesu ropnego spowodowanego przedostaniem się drobnoustroju do krwiobiegu, na przykład z zapaleniem płuc lub zapaleniem kości i szpiku. Towarzyszy jej uporczywa reakcja temperaturowa i może być komplikowane przez infekcyjno-toksyczny wstrząs.

Wnikanie bakterii do krwiobiegu i rozwój bakteriemii ułatwiają:

  • dożylne cewnikowanie
  • cewnikowanie pęcherza
  • wszelkie procedury inwazyjne
  • interwencje chirurgiczne
  • obniżona odporność
  • terapia immunosupresyjna

Posiew krwi w celu uzyskania bezpłodności jest niezbędny dla lekarzy specjalistów, gdy pacjent wykazuje objawy posocznicy.

Co dokładnie jest ustalane podczas analizy?

Hemokultura pozwoli wyizolować przyczynową kulturę bakteryjną stanu septycznego i jej wrażliwość na antybiotyki z różnych grup.

Co oznaczają wyniki testu?

U zdrowej osoby krew jest sterylna.

Typowy czas realizacji testu:

Czy potrzebuję specjalnego przygotowania do analizy?

Nie jest wymagane specjalne szkolenie. Pobieranie krwi wykonuje się w szczycie gorączki przed rozpoczęciem antybiotykoterapii lub 12-24 godziny po ostatnim podaniu pacjentowi leku.

Więcej szczegółów na temat warunków dostawy można znaleźć w sekcji „Przygotowanie”.

Test wrażliwości na antybiotyki: do czego służy i kiedy jest przepisywany

Data aktualizacji: 2017-01-24

Antybiotyki od dawna są nieodzownym składnikiem każdej antybiotykoterapii..

Niestety tempo życia wielu ludzi jest takie, że nie stać ich na długą nieobecność w miejscu pracy..

Z tego powodu samodzielnie przepisują sobie podobne leki przy najmniejszych oznakach przeziębienia..

Jest to jednak absolutnie niemożliwe, ponieważ bakterie są w stanie aktywować specjalny mechanizm obronny przeciwko niektórym lekom..

Test wrażliwości na antybiotyki przeprowadza się metodami laboratoryjnymi w celu określenia czynnika wywołującego daną chorobę i jej ilości w organizmie. To badanie pozwala wybrać optymalny schemat przyjmowania leku..

Eksperci stosują w tym celu dwie główne metody:

  1. empiryczne - informacje uzyskuje się na podstawie wyników obserwacji lub eksperymentów;
  2. etiotropowy - w tym przypadku najpierw identyfikuje się czynnik wywołujący infekcję, a następnie określa się stopień jego wrażliwości na określone czynniki.

W zależności od podatności na antybiotyki eksperci dzielą wszystkie mikroorganizmy na 3 grupy:

  • wrażliwy (S) - do ich wyeliminowania wystarczy standardowa dawka leku;
  • średnio oporne (I) - wymagają maksymalnej ilości antybiotyku;
  • odporne ® - nie można ich wyeliminować nawet przy zwiększonej szybkości.

Jednocześnie reakcja niektórych kategorii bakterii na antybiotyki może się różnić u różnych osób. Dlatego zalecenie zażywania narkotyków wyłącznie na podstawie uśrednionych danych statystycznych czasami nie przynosi pożądanych rezultatów. Ponadto należy pamiętać, że przyjmowanie tej grupy leków niszczy nie tylko chorobotwórcze bakterie, ale także pożyteczną mikroflorę.

Sytuacje nie są rzadkością, gdy nieprawidłowo przepisany lek eliminuje niezbędne bakterie, a szkodliwe drobnoustroje pozostają nienaruszone. Aby leczenie było najskuteczniejsze, każdorazowo, gdy istnieje podejrzenie bakteryjnego charakteru choroby, należy wykonać badanie wrażliwości na antybiotyki..

Lekarz może zlecić takie badanie z następujących powodów:

  • kiedy konieczna jest wymiana leku z powodu rozwiniętych reakcji alergicznych;
  • zidentyfikować najskuteczniejszy lek w tym konkretnym przypadku;
  • na początku fazy uzależnienia od narkotyku;
  • ze względu na niską skuteczność wybranego narzędzia.

Obecnie istnieją 3 główne metody określania wrażliwości bakterii na antybiotyk: dyfuzja krążkowa, test E i metoda seryjnych rozcieńczeń. Wszystkie są badaniami mikrobiologicznymi, dlatego częściej nazywane są inokulacją bakteriologiczną. Najprostszy i najczęstszy to dysko-dyfuzja.

Korzystne środowisko dla bakterii tworzy się w specjalnym naczyniu laboratoryjnym, gdzie są one następnie zaszczepiane. Następnie tekturowe krążki nasączone antybiotykiem umieszcza się na szalce Petriego, a kulturę bakteryjną umieszcza w termostacie i po wyznaczonym czasie specjalista ocenia skuteczność każdego rodzaju antybiotyku w strefie zahamowania wzrostu drobnoustrojów chorobotwórczych. E-test jest przeprowadzany w taki sam sposób, jak w poprzednim badaniu. Tylko w tym przypadku zamiast krążków stosuje się pasek, na który nakłada się antybiotyk w określonej gradacji - jego stężenie wzrasta od wskaźników minimalnych do maksymalnych.

Po 12 godzinach strefa zahamowania wzrostu bakterii będzie wyraźna. Miejsce styku tego obszaru z paskiem definiuje się jako minimalne stężenie hamujące (MIC) - przy dekodowaniu wskaźnik ten oznacza najmniejszą ilość leku potrzebną do zniszczenia określonego typu bakterii.

Ten rodzaj testu wrażliwości na antybiotyki jest drogi i dlatego rzadko jest używany. W przypadku metody seryjnych rozcieńczeń stężenie antybiotyku jest zmniejszone. Kompozycje z probówek są wprowadzane do pożywki (agar lub bulion) i zaszczepiane mikroorganizmami. Następnie naczynia umieszcza się w termostacie na kilka godzin, a następnie analizuje się wyniki. Mętna zawartość probówki wskazuje na obecność patogennej flory, stężenie w niej antybiotyku jest niskie. Ilość leku w pierwszym pojemniku bez zmętnienia zostanie uznana za wystarczającą do leczenia.

Wymaz wrażliwości na antybiotyki: przygotowanie i wykonanie testu

Jako biomateriał do wymazu na antybiotyki stosuje się różne próbki tkanek lub pochodne funkcjonowania ludzkiego organizmu. Próbkę nakłada się na szkło laboratoryjne, a następnie bada pod mikroskopem.

Jeśli podejrzewasz jedną lub inną chorobę, pobierany jest inny materiał. Otolaryngolog (laryngolog) wyśle ​​pacjentkę z możliwą dławicą piersiową na wymaz z gardła i nosa, a ginekolog, rejestrując się na ciążę i poród, z pewnością pobierze śluz z kanału szyjki macicy pacjentki. Aby uzyskać miarodajny wynik, konieczne jest odpowiednie przygotowanie się do analizy. Jeżeli planowane jest pobranie wymazu z narządów moczowo-płciowych (cewki moczowej lub mikroflory pochwy) ze względu na wrażliwość na antybiotyki, należy zrezygnować z kontaktów intymnych. Bezpośrednio przed analizą mężczyźni nie powinni oddawać moczu przez wiele godzin, a kobiety przez co najmniej 2 godziny. Jeśli przeprowadzono kurację antybiotykową, to po jej zakończeniu powinny minąć co najmniej 2 tygodnie.

Jeśli wystąpi stan zapalny, liczba białych krwinek będzie podwyższona. W takim przypadku lekarz zasugeruje standardowy schemat leczenia antybiotykami lub dodatkowe badania. Plwocinę do analizy pobiera się rano na czczo. Przed ogrodzeniem umyj zęby i wypłucz usta. Do badań biomateriał jest dostarczany w ciągu 1 godziny. Pobrane próbki są zaszczepiane na specjalnym podłożu..

Następnie probówki z analizami umieszcza się w termostacie, w którym stwarza idealne warunki do żywotnej aktywności bakterii. W urządzeniu ustawiane są określone parametry: temperatura, wilgotność i okres czasu. Pod koniec wyznaczonego okresu próbki wyjmuje się z termostatu i rozpoczyna się badanie kontrolne wyrosłych kolonii. Na podstawie uzyskanych danych opracowywany jest antybiotykogram, który określa wrażliwość zidentyfikowanych mikroorganizmów na środki przeciwbakteryjne i bakteriofagi.

W zależności od metody badawczej lekarz może otrzymać dane z badań już dzień po przekazaniu biomateriału przez pacjenta do laboratorium. Wyniki rozmazu wrażliwości na antybiotyki uważa się za ważne tylko w trakcie choroby, na którą został przepisany. Ponadto okres ten nie obejmuje czasu przyjmowania antybiotyków - przyjmowanie leków może wpłynąć na wynik badania.

Testy krwi i moczu na wrażliwość na antybiotyki

Do badań często wykorzystuje się inny materiał biologiczny. W poliklinikach szeroko stosuje się badanie krwi na wrażliwość na antybiotyki. Nie jest do tego wymagane specjalne przygotowanie, jedynym warunkiem jest przeprowadzenie badania przed rozpoczęciem antybiotykoterapii.

U dorosłych pacjentów pobiera się co najmniej 15 ml krwi, u dzieci - co najmniej 5 ml. Algorytm pobierania próbek biomateriałów jest prosty - krew pobrana jednorazowym cewnikiem umieszczana jest w sterylnej probówce z gumowym korkiem, w której powstaje pożywka dla patogenów. Z reguły po godzinach wynik badania krwi na wrażliwość na antybiotyki jest już znany, jednak jeśli drobnoustroje należą do klasy wolno rosnących, to wymagana będzie kilkudniowa obserwacja. Równie często stosuje się badanie moczu pod kątem wrażliwości na antybiotyki.

Wskazaniami do tego może być zapalenie pęcherza moczowego, zapalenie cewki moczowej, zapalenie nerek - odmiedniczkowe zapalenie nerek. W takim przypadku wymagane jest przygotowanie. Do analizy pobierana jest przeciętna porcja porannego moczu, natomiast kilka pierwszych i ostatnich kropli nie powinno wpadać do sterylnego pojemnika. Pobieranie biomateriału do analizy moczu pod kątem wrażliwości na antybiotyki przeprowadza się po porannych zabiegach higienicznych bez stosowania środków antyseptycznych.

Chociaż mocz w pęcherzu jest sterylny, po przejściu przez żeńskie narządy płciowe może w niskim stężeniu uzyskać niepatogenne ziarniaki, ale w większości przypadków pozostaje czysty.

U mężczyzn wszystko jest pod tym względem inne: całe spektrum mikroorganizmów - gronkowców, błonicy i niektórych niepatogennych bakterii - dostaje się do moczu z przedniej części cewki moczowej. Małe odchylenia w interpretacji analizy moczu pod kątem wrażliwości na antybiotyki należą do kategorii normalnej. W niektórych przypadkach (na przykład w przypadku laktacyjnego zapalenia gruczołu mlekowego) do analizy pobiera się mleko matki.

Próbkę pobiera się przed karmieniem dziecka w następujący sposób:

  • leczyć skórę wokół sutka alkoholem;
  • odciąga się niewielką ilość mleka - około 15 ml, kolejny płyn z każdej piersi zbierany jest w osobnym pojemniku. Biomateriał należy dostarczyć do laboratorium nie później niż 2 godziny później.

Badanie nasienia wykonuje się w przypadku podejrzenia procesu zapalnego lub choroby zakaźnej. Wytrysk uzyskuje się poprzez masturbację lub wibrację penisa. Dodatkowo istnieje możliwość stymulacji ośrodka wytrysku za pomocą elektrod wprowadzanych do odbytnicy..

Nasienie zbiera się w czystym i suchym pojemniku podgrzanym do temperatury ciała. Przed pobraniem biomateriału należy dokładnie umyć ręce i genitalia. Lepiej jest powstrzymać się od intymnych relacji przez kilka dni przed pobraniem próbek. W tym samym okresie nie należy pić alkoholu i odwiedzać łaźni. Podczas badania krwi pod kątem wrażliwości na antybiotyki, a także moczu, kału, mleka matki i nasienia, próbkę umieszcza się w specjalnym środowisku sprzyjającym żywotnej aktywności bakterii chorobotwórczych.

W procesie rozmnażania tworzą kolonie - są następnie oceniane przez specjalistę. Na podstawie uzyskanych danych opracowywany jest antybiogram - lista leków przeciwbakteryjnych, na które wrażliwe są bakterie występujące w organizmie. Nie można jednoznacznie odpowiedzieć na pytanie o czas przygotowania analizy. Zależy to bezpośrednio od biomateriału. Zwykle wystarczy przeprowadzić badanie, ale w niektórych przypadkach może to zająć tydzień, a nawet dwa.

Test wrażliwości na antybiotyki jest ważny tylko przez okres choroby, w którym został zalecony. Po zabiegu antybakteryjnym obraz może się diametralnie zmienić. Jeśli podejrzewasz chorobę zakaźną, w żadnym wypadku nie powinieneś samoleczać i przyjmować antybiotyków. Jest to obarczone poważnymi konsekwencjami. Takie decyzje powinien podejmować tylko wysoko wykwalifikowany specjalista..

Test wrażliwości na antybiotyki: sposób przyjmowania, interpretacja wyników

Jeśli lekarz prowadzący podejrzewa obecność bakteryjnego charakteru choroby pacjenta, na pewno poprosi o wykonanie testu wrażliwości na antybiotyk. Ta procedura pomaga lekarzom przepisać odpowiednie leki, ponieważ mikroorganizmy mogą mutować i rozwijać na nie oporność..

Ogólne informacje o trwającym badaniu

Badanie to jest laboratoryjną metodą oznaczania leku, który ma największy wpływ na patogeny, które spowodowały rozwój tej konkretnej choroby..

Rynek farmaceutyczny oferuje ogromny wybór leków, zarówno pod względem skutecznego działania, jak i kosztów. Dlatego, aby wybrać najskuteczniejszy środek przeciwbakteryjny, zaleca się kulturę bakteriologiczną.

Wskazania do celów analizy

W celu doboru właściwej terapii lekarz zaleca wykonanie badania. Zaleca się wykonanie testu wrażliwości na antybiotyki w celu określenia najbardziej skutecznego i odpowiedniego leku w danym przypadku. Najczęściej jest to konieczne do leczenia infekcji przenoszonych drogą płciową. Ponadto określenie najskuteczniejszego antybiotyku jest warunkiem wstępnym leczenia chorób u dzieci..

Ponadto określenie wrażliwości jest konieczne, aby uniknąć rozwoju oporności mikroorganizmów na antybiotyki. Jeśli pacjent już wcześniej przyjmował antybiotyki, a teraz konieczne jest przeprowadzenie drugiego cyklu leczenia, lek należy wymienić na inny. Ten sposób działania pozwala na stosowanie mniejszej dawki leku i zapobieganie mutacji patogenu. Na oddziałach chirurgii ropnej antybiotyki wymieniane są co kilka miesięcy.

Test wrażliwości bakterii jest konieczny, gdy pacjent ma reakcje alergiczne na określoną grupę leków..

Bardzo częste jest również badanie moczu pod kątem wrażliwości na antybiotyki..

Metoda dyfuzji dyskowej

Obecnie istnieje kilka podstawowych metod określania wrażliwości mikroorganizmów na antybiotyk. Najpowszechniejszą i najprostszą jest metoda dyskowa lub dyskowa.

Aby określić czułość metodą dyfuzyjno-krążkową, badany materiał (zawiesina bakterii) rozprowadza się po powierzchni zamrożonego agaru na szalce Petriego. Następnie umieszcza się tam tekturowe krążki nasączone niektórymi antybiotykami. Następnie kulturę bakteryjną zamyka się i umieszcza w termostacie w temperaturze 35-37 ° C na 12-18 godzin. Rozprzestrzenianie się antybiotyku pociąga za sobą powstawanie strefy zahamowania wzrostu bakterii wokół krążków papierowych. Po upływie określonego czasu wynik jest sprawdzany poprzez pomiar średnicy tej strefy..

Test elektroniczny

Drugim testem wrażliwości na antybiotyki jest test E. Odbywa się to podobnie jak w poprzedniej metodzie, tylko zamiast krążków tekturowych stosuje się pasek E-test, który zawiera gradient stopnia nasycenia antybiotykiem od minimum do maksimum. Po dwunastogodzinnej inkubacji w termostacie specjalista wyjmuje kubek i ocenia skuteczność każdego rodzaju antybiotyku, przyglądając się konkretnemu miejscu styku strefy zahamowania wzrostu bakterii oraz skali paska. Będzie to minimalne stężenie leku potrzebne do leczenia choroby..

Zaletą metod dyfuzyjnych jest dostępność dla każdego laboratorium bakteriologicznego oraz łatwość wykonywania badań. Jednak koszt testów E jest wysoki, więc jest to najczęściej stosowana metoda dyfuzji dyskowej.

Sposób wykonania testu - kultura wrażliwości na antybiotyki?

Metody hodowli

Metody te opierają się na stosowaniu kolejnych podwójnych rozcieńczeń leku przeciwbakteryjnego od maksymalnego do minimalnego stężenia. W tym przypadku różne stężenia antybiotyku są rozprowadzane na płynnej pożywce (bulionie) lub agarze. Następnie zawiesinę bakteryjną umieszcza się na powierzchni agaru w naczyniu lub w bulionie z antybiotykami. Po dwunastogodzinnej inkubacji w termostacie w temperaturze 35-37 ° C eksperci analizują uzyskane wyniki.

Zmętnienie bulionu (wzrost bakterii) lub powierzchni agaru wskazuje, że to stężenie antybiotyku jest niewystarczające, aby zahamować żywotność mikroorganizmów. Wzrost stężenia antybiotyku osłabi rozwój bakterii. Po serii kolejnych rozcieńczeń antybiotyku za minimalne stężenie hamujące (MIC), czyli wystarczające do leczenia, uznaje się pierwsze najniższe stężenie, przy którym nie obserwuje się wzrostu bakterii.

Rozszyfrowanie testu wrażliwości na antybiotyki

Na podstawie uzyskanych danych (wartości MIC lub średnica strefy zahamowania wzrostu) bakterie dzieli się na wrażliwe, średnio oporne i oporne. Aby oddzielić te kategorie oporności (lub wrażliwości), stosuje się graniczne stężenia antybiotyków.

Wartości te nie są stałe i są korygowane w zależności od zmian wrażliwości bakterii. Kryteria są weryfikowane i rozwijane przez mikrobiologów i chemoterapeutów, którzy są członkami specjalnych komisji.

W sumie istnieją dwie metody interpretacji otrzymanych wyników analizy wrażliwości: kliniczna i mikrobiologiczna. Ta ostatnia opiera się na badaniu wartości rozkładu stężenia antybiotyku hamującego żywotną aktywność mikroorganizmów. Kliniczna metoda interpretacji opiera się na ocenie skuteczności antybiotykoterapii.

Jak uzyskać test wrażliwości na antybiotyki?

Wrażliwe bakterie

Co oznacza ta ciekawa koncepcja??

Klinicznie drobnoustroje uważa się za podatne, jeśli podczas leczenia standardową dawką antybiotyku, zakażenie wywołane przez te bakterie, obserwuje się dobry efekt terapeutyczny.

Jeśli nie są dostępne wiarygodne informacje kliniczne, kategoryzacja oporności opiera się na zagregowanych wynikach in vitro, jak również na stężeniu antybiotyku w surowicy..

Odporne bakterie

Które są odporne?

Drobnoustroje są klasyfikowane jako oporne, gdy podczas leczenia chorób wywoływanych przez te bakterie nie obserwuje się pozytywnego efektu terapii, nawet przy stosowaniu maksymalnej dawki antybiotyku. Bakterie te mają mechanizm oporności.

Wykonanie testu moczu na wrażliwość na antybiotyki jest dość proste.

Odporność pośrednia mikroorganizmów

Mówiąc o pośredniej odporności bakterii, mają na myśli przypadek, gdy choroba wywoływana przez te szczepy ma inny efekt terapeutyczny. Terapia może być skuteczna, jeśli zastosuje się zwiększoną dawkę antybiotyku lub jeśli infekcja jest zlokalizowana w miejscu, w którym gromadzi się najwyższe stężenie leku przeciwbakteryjnego.

Czasami oporne organizmy i szczepy o średniej oporności są grupowane w jedną kategorię opornych bakterii.

W niektórych sytuacjach, przy braku wyników badań wrażliwości typowymi metodami, stosuje się definicję minimalnego stężenia bakteriobójczego.

Wiele osób interesuje się dekodowaniem testu moczu pod kątem wrażliwości na antybiotyki.

Minimalne stężenie bakteriobójcze (MBC)

Mówiąc o minimalnym stężeniu bakteriobójczym (MBC), mamy na myśli najniższe stężenie antybiotyku, które w badaniu in vitro powoduje zniszczenie 99,9% bakterii ze wskaźnika początkowego w określonym przedziale czasu.

Wskaźnik MBC jest stosowany podczas leczenia antybiotykami, które mogą mieć działanie bakteriostatyczne lub w przypadku braku efektu antybiotykoterapii u szczególnej kategorii pacjentów. Szczególne przypadki stosowania MBC obejmują zapalenie kości i szpiku, bakteryjne zapalenie wsierdzia lub uogólnione infekcje u pacjentów z obniżoną odpornością..

Który jest używany jako próbka do zbiornika. test wrażliwości na antybiotyki?

Badanie wrażliwości bakterii na antybiotyki przeprowadza się przy użyciu następujących płynów biologicznych:

Dodatkowo w celu wykrycia miejscowej wrażliwości pobierany jest materiał z cewki moczowej, górnych dróg oddechowych czy kanału szyjki macicy.

Wreszcie

Podsumowując, chciałbym powiedzieć, że w chwili obecnej nie ma sposobów, które z absolutną pewnością pozwoliłyby przewidzieć potencjalne kliniczne działanie antybiotyków w leczeniu chorób wywołanych przenikaniem patogenów do organizmu. Jednak wyniki określania wrażliwości mogą być dla lekarza doskonałą wskazówką przy wyborze i dostosowaniu leczenia przeciwbakteryjnego..

Przyjrzeliśmy się, jak przeprowadza się badanie wrażliwości na antybiotyki.