METODA OKREŚLANIA GRUP KRWI

OZNACZANIE GRUP KRWI W SYSTEMIE AVO

ANTYGENY PLAZMOWE

Antygeny osocza (surowicy) to specyficzne kompleksy aminokwasów lub węglowodanów na powierzchni cząsteczek białek osocza (surowicy).

KONCEPCJA GRUPY KRWI

GRUPA KRWI to połączenie normalnych immunologicznych i genetycznych cech krwi, która jest dziedzicznie określona i stanowi biologiczną właściwość każdego osobnika.

Grupy krwi są dziedziczone, tworzą się po 3-4 miesiącach rozwoju wewnątrzmacicznego i pozostają niezmienione przez całe życie. Uważa się, że grupa krwi u ludzi obejmuje kilkadziesiąt antygenów w różnych kombinacjach. Te kombinacje - grupy krwi - mogą w rzeczywistości wynosić kilka miliardów. Są praktycznie takie same tylko u identycznych bliźniaków o tym samym genotypie..

W medycynie praktycznej termin „grupa krwi” z reguły odzwierciedla połączenie antygenów erytrocytów układu ABO i czynnika Rh oraz odpowiednich przeciwciał w surowicy krwi.

Dla każdego znanego antygenu znaleziono przeciwciała o tej samej nazwie (anty-A, anty-B, przeciw rezus, anty-Kell, itp.). Grupowe przeciwciała krwi nie są tak stałą właściwością ludzkiego ciała jak antygeny. Jedynie w układzie grupy ABO przeciwciała są normalną wrodzoną właściwością osocza krwi. Te przeciwciała (aglutyniny a i b) są stale obecne w ludzkim osoczu krwi..

1. GRUPY KRWI WEDŁUG SYSTEMU AVO

Termin „zgodność” oznacza połączenie krwi dawcy i biorcy dla antygenów i przeciwciał, które nie powoduje interakcji immunologicznych.

W zależności od obecności w erytrocytach aglutynogenów A i B oraz w surowicy odpowiednich aglutynin a i b, wszyscy ludzie są podzieleni na cztery grupy:

• Grupa O (I) - nie ma aglutynogenów w erytrocytach, aglutyniny a i b w surowicy.

• Grupa A (II) - aglutynogen A w erytrocytach, aglutynina b w surowicy.

• Grupa B (III) - aglutynogen B w erytrocytach, aglutynina a w surowicy.

• Grupa AB (IV) - aglutynogeny A i B w erytrocytach, brak aglutynin w surowicy.

Antygen A nie jest jednorodny, istnieją dwa główne podtypy: W związku z tym grupa A (II) ma dwie podgrupy A (P) i A2 (II) i grupa AB (IV) - AB (IV) i A2B (IV).

Antygen grupy B jest bardziej jednorodny, chociaż opisano rzadkie warianty. Nie ma to jednak znaczącego znaczenia klinicznego..

Grupę krwi według systemu ABO określa się za pomocą reakcji aglutynacji. Obecnie do określania grup krwi według systemu ABO stosuje się trzy metody:

• zgodnie ze standardowymi surowicami izohemaglutynującymi,

• zgodnie ze standardowymi surowicami izohemaglutynującymi i standardowymi erytrocytami (metoda krzyżowa),

• przy użyciu przeciwciał monoklonalnych (tsoliclony anty-A i aiti-B).

Podczas rutynowego badania lekarz szpitala określa grupę krwi za pomocą standardowych surowic izohemaglutynujących lub za pomocą tsoliclonów, po czym przesyła krew do laboratorium serologicznego w celu sprawdzenia grupy metodą krzyżową.

Grupę krwi uważa się za określoną tylko wtedy, gdy laboratorium potwierdzi dane uzyskane przez lekarza szpitalnego. Jeżeli wyniki badań różnią się od siebie, oba badania należy powtórzyć..

W nagłych wypadkach (w przypadku krwawienia wymagana jest pilna transfuzja krwi), lekarz szpitalny sam określa grupę (w laboratorium przeprowadza się ponowne sprawdzenie, ale po fakcie).

OZNACZANIE GRUP KRWI STANDARDOWYM SERUMEM IZOGEMAGLUTYNUJĄCYM

Najczęściej w praktyce klinicznej i laboratoryjnej.

Istotą metody jest wykrycie antygenów grupy A i B w badanej krwi przy użyciu standardowych surowic izohemaglutynujących. Wykonywane w pomieszczeniu z dobrym oświetleniem w temperaturze 15-25 ° С.

a) Niezbędne wyposażenie

• Standardowe surowice izohemaglutynujące z grup O (I), A (II), B (III) i AB (IV) w dwóch różnych seriach. Serum powinno być przezroczyste, bez śladów próchnicy. Dla wygody standardowe surowice hemaglutynujące z różnych grup są zabarwione na określony kolor: O (I) - bezbarwny (szary), A (II) - niebieski, B (III) - czerwony, AB (IV) - jasnożółty. Należy zauważyć, że te kolory towarzyszą wszystkim etykietom na produktach krwiopochodnych, które mają przynależność do grupy (krew, masa erytrocytów, osocze itp.).

• Białe płytki porcelanowe lub emaliowane lub inne płytki o zwilżonej powierzchni, oznaczone 0 (1), A (P), H (W), AB (IV).

• Izotoniczny roztwór chlorku sodu.

• Igły, pipety, szklane pręty (szkiełka).

b) Technika reakcji

1. Na płytkę (płytkę) nanieść standardowe surowice izohemaglutynujące z grup I, II, III w objętości 0,1 ml (jedna duża kropla o średnicy około 1 cm). Aby uniknąć błędów, stosuje się dwie serie surowic z każdej grupy. Łącznie 6 kropli.

2. Sześć kropli krwi testowej o wielkości zbliżonej do główki szpilki 0,01 ml (mała kropla) jest kolejno przenoszonych suchym pręcikiem szklanym na płytkę w 6 punktach, każda obok kropli standardowej surowicy (ilość badanej krwi powinna być około 10 razy mniejsza niż ilość standardowej surowicy ), a następnie delikatnie wymieszaj je szklanymi prętami o zaokrąglonych krawędziach.

3. Po wymieszaniu talerz jest okresowo kołysany..

Aglutynacja rozpoczyna się w ciągu pierwszych 10-30 sekund.

4. Do kropli, w których wystąpiła aglutynacja, dodać jedną kroplę izotonicznego roztworu chlorku sodu, po czym ocenia się wynik reakcji..

Przy pozytywnej reakcji, zwykle w ciągu pierwszych 10-30 sekund, w mieszaninie pojawiają się małe czerwone ziarenka (aglutynaty), składające się z sklejonych czerwonych krwinek, widoczne gołym okiem.

Jeśli surowice wszystkich trzech grup są pozytywne, oznacza to, że badana krew zawiera oba aglutynogeny - A i B i należy do grupy AB (IV). Jednak w takich przypadkach, aby wykluczyć niespecyficzną reakcję aglutynacji (zimna aglutynacja, pangglutynacja, alergia) konieczne jest przeprowadzenie dodatkowego badania kontrolnego badanej krwi standardową surowicą izohemaglutynującą z grupy AB (IV), która nie zawiera aglutynin. Dopiero brak aglutynacji w tym spadku w obecności aglutynacji w kroplach zawierających standardowe surowice z grup 0 (1), A (II) i B (III) pozwala uznać reakcję za specyficzną i skierować badaną krew do grupy AB0 (IV).

Należy zauważyć, że w przypadku obecności słabego podtypu antygenu A we krwi badanej, reakcja aglutynacji z surowicami hemaglutynującymi z grupy 0 (1) i B (III) rozpoczyna się później (po 3-4 minutach). Aby dokładnie określić podtyp antygenu A, konieczne jest przeprowadzenie dodatkowej reakcji z tzw. Odczynnikiem anty-A.

OZNACZANIE GRUP KRWI WEDŁUG STANDARDOWEGO SUROWICY ISOGEMAGLUTYNUJĄCEJ I STANDARDOWYCH ERYTRYCYTÓW (METODA KRZYŻOWA)

Metodę najczęściej stosuje się w laboratoriach serologicznych. Istota metody polega na określeniu obecności lub braku antygenów grupowych A i B w badanej krwi przy użyciu standardowych surowic izohemaglutynujących, a także przeciwciał grupowych a i b przy użyciu standardowych erytrocytów.

• Wyposażenie do reakcji ze standardowymi erytrocytami różni się tym, że reakcja aglutynacji wymaga standardowych erytrocytów z trzech grup krwi: 0 (1), A (II), B (III).

• Standardowe erytrocyty przygotowywane są z krwi dawców o znanej wcześniej grupie krwi, przechowywane w temperaturze 4-8 ° C.

Na oznaczoną płytkę z pipetą w sześciu komórkach nanosi się jedną dużą kroplę surowicy krwi badanej z probówki (0,1 ml), a obok nich jedną małą kroplę (0,01 ml) standardowych erytrocytów z grupy 0 (1), A (P) H (W) (dwie serie).

Cechą interpretacji wyników reakcji ze standardowymi erytrocytami jest to, że erytrocyty z grupy 0 (1) są kontrolne (nie mają antygenów, co zasadniczo uniemożliwia specyficzną reakcję aglutynacji z jakąkolwiek surowicą).

OZNACZANIE GRUP KRWI PRZEZ PRZECIWCIAŁO MONOKLONALNE

Do określenia grupy krwi stosuje się przeciwciała monoklonalne, do których stosuje się biotechnologię hybrydomy.

Hybrydom jest hybrydą komórkową utworzoną przez fuzję komórki nowotworowej szpiku kostnego (szpiczaka) z limfocytem odpornościowym, który syntetyzuje specyficzne przeciwciała monoklonalne. Hybrydoma nabywa właściwości obojga „rodziców”: zdolność do nieograniczonego wzrostu, charakterystyczną dla komórki nowotworowej, oraz zdolność do syntezy przeciwciał nieodłączną dla limfocytów odpornościowych.

Opracowano standardowe odczynniki - przeciwciała monoklonalne (MCA): tsoliclony anty-A i anty-B, które służą do oznaczania aglutynogenów erytrocytów. Cyklony to liofilizowany proszek koloru czerwonego (anty-A) lub niebieskiego (anty-B), który rozcieńcza się izotonicznym roztworem chlorku sodu bezpośrednio przed badaniem.

Cyklony anty-A i anty-B nanosi się na białą płytkę w jednej dużej kropli (0,1 ml) pod odpowiednimi etykietami: anty-A lub anty-B. Jedną małą kroplę (0,01 ml) badanej krwi nanosi się obok kropli przeciwciał. Po zmieszaniu składników obserwuje się reakcję aglutynacji przez 2-3 minuty..

W 1940 roku K. Landsteiner i A.S. Wiener odkryli w ludzkich erytrocytach zupełnie nowy antygen, który nazwali czynnikiem Rh (Rh). Czynnik Rh jest obecny we krwi 85% ludzi, a 15% ludzi nie zawiera tego czynnika. Nazwa pochodzi od małpy rezus, która zawsze ją ma.

Antygeny rezusa są klasyfikowane jako lipoproteiny. Są bardzo aktywne i zdolne do indukowania tworzenia przeciwciał immunologicznych.

Obecność antygenu Rh jest wykrywana u płodu ludzkiego od 5-8 tygodnia i jest dobrze wyrażana w 3-4 miesięcznym zarodku.

|następny wykład ==>
TRANSFUZJA KRWI|METODY OKREŚLANIA WSPÓŁCZYNNIKA RHESUSU

Data dodania: 2014-01-06; Wyświetlenia: 7749; naruszenie praw autorskich?

Twoja opinia jest dla nas ważna! Czy zamieszczony materiał był pomocny? Tak | Nie

Krzyżowe oznaczanie grup krwi (ze standardowymi surowicami izohemaglutynującymi i standardowymi erytrocytami)

Wniosek o przynależności do grupy wysuwa się na podstawie obecności lub braku antygenów A i B na erytrocytach, a także obecności przeciwciał anty-A i anty-B we krwi badanej. Do badania używane są standardowe surowice izohemaglutynujące z grup 0, A, B, AB oraz standardowe erytrocyty z grup krwi 0, A i B.

standardowa izohemaglutynująca surowica grup krwi 0 (anty-A, anty-B); A (anty-B); B (anty-A); AB;

roztwór chlorku sodu 0,9%; płytki ze zwilżoną powierzchnią; pipety;

patyczki szklane lub plastikowe; standardowe erytrocyty A, B, 0.

Procedura badawcza

1. Zaznacz tabliczkę, dla której podaj pełną nazwę. osoba, której grupa krwi jest określana, a także wpisuje swoistość surowic izohemaglutynujących w kolejności ich aplikacji: 0 (anty-A + B), A (anty-B), B (anty-A).

2. Nałożyć jedną dużą kroplę (0,1 ml) standardowej surowicy z odpowiedniej grupy. Do badań użyj dwóch serii surowic z każdej grupy..

3. Na dolną część płytki, pod odpowiednim oznaczeniem, nanieść jedną małą kroplę (0,01 ml) standardowych erytrocytów 0, A, B.

4. Ostrożnie pobierz surowicę z probówki wraz z badaną krwią i umieść jedną dużą kroplę na przygotowanych standardowych erytrocytach..

5. Tą samą pipetą pobierz testowe erytrocyty z probówki i umieść małe krople (0,01 ml) badanej krwi obok każdej kropli standardowej surowicy..

Wymieszaj krople, obserwuj postęp reakcji wstrząsając płytką. Aglutynacja występuje zwykle w pierwszej minucie obserwacji, jednak wynik reakcji ocenia się po pięciu minutach. Przed odczytaniem wyników dodaj 0,05 ml roztworu chlorku sodu do kropli, w których wystąpiła aglutynacja.

Klasyczne grupy krwi AB0

W zależności od obecności aglutynogenów A i B w ER oraz w surowicy odpowiadających im aglutynin α i β wszyscy ludzie dzielą się na cztery grupy: aglutynity - AT alfa i beta, aglutynogeny - AG

• grupa 0 (I): w ER nie ma aglutynogenów, w surowicy są aglutyniny α i β;

• grupa A (II): w ER - aglutynogen A, w surowicy - aglutynina β;

• grupa B (III): aglutynogen B jest obecny w ER, aglutynina α jest wykrywana w surowicy;

• grupa AB (IV): w ER - aglutynogeny A i B, w surowicy nie ma aglutynin.

Ostatnio w systemie AB0 odmiany klasycznych antygenów A i B, a także inne antygeny.

Podtypy antygenu A: • Podtyp1 ma wyższą adsorpcję aglutyniny w porównaniu do aglutynogenu A.2, (I3, I4, ZAz - są rzadkie). Podtypy antygenów B -1,2,3 nie mają znaczenia klinicznego. Chimery krwi - występujące u bliźniaków - jednoczesna obecność ER należąca do 2 fenotypów.

Metody określania grupy krwi

Przynależność krwi do grupy według systemu AB0 określa się na podstawie reakcji aglutynacji: • przy użyciu standardowych surowic izohemaglutynujących; • przy użyciu standardowych surowic izohemaglutynujących i standardowej ER (metoda krzyżowa); • przy użyciu przeciwciał monoklonalnych (tsoliclony anty-A i anty-B).

Przy planowanej izo lekarz określa grupę krwi za pomocą standardowych surowic izohemaglutynujących, po czym przesyła krew serologowi do laboratorium w celu sprawdzenia grupy metodą krzyżową. Jeżeli wyniki badań różnią się, oba badania należy powtórzyć..

Oznaczanie grup krwi przy użyciu standardowych surowic izohemaglutynujących:

Wykrywanie grup AH A i B w badanej krwi przy użyciu standardowych surowic izohemaglutynujących. Aby to zrobić, użyj reakcji aglutynacji.

Wymagane: 1. Standardowe surowice izohemaglutynujące z grup 0 (I), A (II), B (III) i AB (IV) w dwóch różnych seriach. Surowice do wykrywania grup krwi wykonywane są w specjalnych laboratoriach serologicznych z krwi oddanej. Surowice są przechowywane w temperaturze 4-8 C (w lodówce). Dla wygody standardowe surowice hemaglutynujące z różnych grup są barwione tak, aby miały określony kolor: 0 (I) - bezbarwny, A (II) - niebieski, B (III) - czerwony, AB (IV) - jasnożółty.

Metoda reakcji

1. Na płytce nanosi się pełną nazwę, po czym nanosi się standardowe surowice izohemaglutynujące z grup I, II i III w objętości 0,1 ml (kropla o średnicy około 1 cm). Aby uniknąć błędów, stosuje się dwie serie surowic z każdej grupy, ponieważ jedna z serii może mieć niską aktywność i nie dawać wyraźnej aglutynacji. W sumie uzyskuje się sześć kropli, tworząc dwa rzędy po trzy krople w następującej kolejności od lewej do prawej: 0 (I), A (P), B (W).

2. Krew do badań pobierana jest z palca lub z żyły. Sześć kropli krwi testowej, w przybliżeniu wielkości główki szpilki (0,01 ml, mała kropla), jest kolejno przenoszonych suchym szklanym pręcikiem na płytkę w sześciu punktach, każda obok kropli standardowej surowicy (krew jest 10 razy mniejsza niż ilość standardowej surowicy, z którą jest mieszana ), a następnie wymieszaj.

3. Po wymieszaniu talerz jest okresowo kołysany..

Aglutynacja rozpoczyna się w ciągu pierwszych 10-30 sekund, jednak obserwację należy prowadzić do 5 minut ze względu na możliwość późniejszej aglutynacji np. Z erytrocytami z grupy A2(Ii).

4. Do kropli, w których wystąpiła aglutynacja, dodać jedną kroplę izotonicznego roztworu chlorku sodu, po czym ocenia się wynik reakcji..

Test aglutynacji może być pozytywny lub negatywny. Przy pozytywnej reakcji widoczne małe czerwone ziarenka (aglutynaty), składające się z sklejonych erytrocytów, zwykle pojawiają się w mieszaninie w ciągu pierwszych 10-30 sekund. W takim przypadku serum jest częściowo lub całkowicie odbarwione. Pozytywna reakcja może być piaszczysta lub płatkowa..

W przypadku negatywnej reakcji kropla pozostaje jednolicie zabarwiona na czerwono, nie ma w niej ziaren (aglutynatów).

Należy zauważyć, że jeśli surowice wszystkich trzech grup dały pozytywną reakcję, oznacza to, że badana krew zawiera oba aglutynogeny (A i B) i należy do grupy AB (IV).

Identyfikację podgrup antygenu A przeprowadza się w laboratorium serologicznym przy użyciu specjalnych ekstraktów z nasion Dolichos biflorus i Ulex Europeus. Pierwsza z nich aglutynuje erytrocyty z antygenem A.1, ale nie reaguje z antygenem A.2, a drugi odwrotnie.

Określanie grup krwi w sposób krzyżowy

Często używany w laboratoriach serologicznych. Istotą metody jest określenie obecności lub braku antygenów grupowych A i B w badanej krwi przy użyciu standardowych surowic izohemaglutynujących, a także przeciwciał grupowych α i β przy użyciu standardowych erytrocytów. Reakcję ze standardowymi surowicami przeprowadza się jak opisano powyżej..

Reakcję ze standardowymi erytrocytami przeprowadza się w następujący sposób.

Sprzęt do reakcji ze standardowymi erytrocytami różni się tym, że wymaga standardowych erytrocytów z trzech grup krwi: 0 (I), A (II), B (III). Standardowe erytrocyty przygotowywane są z krwi dawców o znanej wcześniej grupie krwi, przechowywane w temperaturze 4-8 C.Okres trwałości 2-3 dni.

Metoda reakcji

1. Krew do badań pobierana jest z żyły do ​​suchej probówki, odwirowywana lub pozostawiana sama na 20-30 minut w celu uzyskania surowicy.

2. Na oznaczoną płytkę pipetą nanieść trzy duże krople (0,1 ml) surowicy krwi badanej z probówki, a obok nich jedną małą kroplę (0,01 ml) standardowych erytrocytów grup.

3. Krople miesza się szklanymi prętami, płytkę wstrząsa się, obserwuje przez 5 min, w kropelki z aglutynacją, dodaje z roztworu chlorku sodu, następnie.

Ocena wyników oznaczania grupy krwi metodą krzyżową

Specyfika interpretacji wyników reakcji ze standardowymi erytrocytami - erytrocyty z grupy 0 (I) są uważane za kontrolę (nie zawierają antygenów, co zasadniczo uniemożliwia specyficzną reakcję aglutynacji z jakąkolwiek surowicą).

Wynik jest wiarygodny, jeśli podczas oceny wyników p ze standardowymi surowicami izohemaglutynującymi i standardowymi erytrocytami, odpowiedzi dotyczące badanej grupy krwi są zgodne.

Oznaczanie grup krwi za pomocą przeciwciał monoklonalnych Stosowane są przeciwciała monoklonalne, do których wykorzystuje się biotechnologię hybrydomy.

Hybrydoma jest hybrydą komórkową utworzoną przez fuzję komórki nowotworowej szpiku kostnego (szpiczaka) z limfocytem odpornościowym, który syntetyzuje specyficzne przeciwciała monoklonalne. Hybrydoma nabywa właściwości obojga „rodziców”: zdolność do nieograniczonego wzrostu, charakterystyczną dla komórki nowotworowej, oraz zdolność do syntezy przeciwciał nieodłączną dla limfocytów odpornościowych.

Cyklony anty-A i anty-B nanosi się na białą płytkę w jednej dużej kropli (0,1 ml) pod odpowiednimi etykietami: anty-A i anty-B. Obok nich nanosi się jedną małą kroplę (0,01 ml) badanej krwi. Po zmieszaniu składników obserwuje się reakcję aglutynacji przez 2-3 minuty..

Możliwe błędy • niska jakość odczynników (standardowe surowice izohemaglutynujące i standardowe erytrocyty mogą mieć niską zdolność aglutynacji - patrz okres przydatności do spożycia, warunki przechowywania i rodzaj); • błędy techniczne (słabe oświetlenie, temperatura powyżej 25 - spowalnia reakcję lub poniżej 15 - aglutynacja wszystkich grup cr, dodając niespójność kropli), • cechy badanej krwi.

15. Czynnik Rh jest obecny we krwi 85% ludzi, au 15% jest nieobecny.

System Rhesus AG jest reprezentowany przez pięć podstawowych AG: D, C, C, E, e cat znajdują się na 2 chromosomach. Najbardziej aktywny ze wszystkich AG Rho(D) - współczynnik Rh. W zależności od jej obecności lub braku, ludzka krew dzieli się na Rh-dodatnie (Rh +) i Rh-ujemne (Rh -).

1) Metody określania czynnika Rh w praktyce klinicznej: użyj szybkich metod określania (współczynnik D). Do badań można użyć świeżej nieskrzepniętej krwi pobranej z palca przed badaniem lub zakonserwowanej krwi bez obróbki wstępnej, a także erytrocytów z probówki po utworzeniu skrzepu i osiadaniu surowicy.

Metoda Badanie przeprowadza się w probówkach wirówkowych o pojemności co najmniej 10 ml. Na dno probówki umieszcza się jedną kroplę standardowego odczynnika uniwersalnego, jakim jest surowica AB (IV) przeciwko rezusowi, rozcieńczona 33% roztworem dekstranu. Następnie dodaj do niego jedną kroplę krwi isse (lub ER). Dzięki kolistemu obrotowi probówki zawartość jest rozsmarowywana na jej wewnętrznej powierzchni, dzięki czemu zawartość rozprzestrzenia się wzdłuż ścian (przyspiesza p). Aglutynacja następuje w ciągu 1 minuty, ale należy odczekać 3 minuty. Następnie, aby wykluczyć niespecyficzną agregację EER, dodać 2-3 ml roztworu fizjologicznego do probówki i wymieszać, odwracając probówkę raz lub dwa razy (bez wstrząsania!). Interpretacja wyników Obecność aglutynacji (duże płatki na tle klarownej cieczy) wskazuje na przynależność Rh dodatnią. Brak aglutynacji (jednolicie zabarwiony różowy płyn w probówce) - Przynależność Rh ujemna.

2) Laboratoryjne metody określania współczynnika Rh

1. Metoda aglutynacji w podłożu solankowym Stosuje się specjalną surowicę zawierającą kompletne przeciwciała przeciw rezusowi. Erytrocyty w postaci 2% zawiesiny w izotonicznym roztworze chlorku sodu łączy się w probówkach z surowicą przeciw rezusowi. Probówki umieszcza się na 1 godzinę w termostacie w temperaturze 37 C, po czym osad ER na dnie bada się za pomocą szkła powiększającego, a wynik uwzględnia jego kształt. Z wynikiem dodatnim (Rh +) osad ma charakterystyczny wzór w postaci nitek lub ziarnistości. Jeśli jest ujemny, jest to prawidłowo zarysowany okrąg.

2. Metoda aglutynacji w obecności żelatyny B dwie probówki umieszcza się w 0,02-0,03 ml osadu badanych erytrocytów. Następnie dodać 2 krople (0,1 ml) 10% roztworu żelatyny i 2 krople (0,1 ml) surowicy przeciw rezusowej do pierwszej probówki, 2 krople (0,1 ml) 10% roztworu żelatyny do drugiej (kontrolnej) probówki i 2 krople (0,1 ml) soli fizjologicznej.

Zawartość delikatnie wymieszać. Następnie probówki inkubuje się w termostacie w temperaturze 45-48 ° С przez 30 minut, po czym dodaje się 5-8 ml roztworu fizjologicznego i probówki odwraca się 1-2 razy w celu wymieszania.

Wynik jest brany pod uwagę, oglądając probówki pod światłem gołym okiem lub przez szkło powiększające. Jeśli ER jest dodatni, będą się aglutynować. Brak aglutynacji - krew Rh-ujemna. W probówce kontrolnej nie powinno być aglutynacji erytrocytów.

3. Pośredni test antyglobulinowy (reakcja Coombsa) w przypadku trudności z określeniem przynależności Rh krwi, związanych z niewyraźnymi wynikami. Reakcja opiera się na zastosowaniu surowicy antyglobulinowej.

Podczas przetwarzania Rh-dodatnich ER z niekompletnymi przeciwciałami, zostają one otoczone, uczulone na surowicę antyglobulinową, która aglutynuje uczulone ER, ponieważ ma przeciwciała przeciwko globulinom.

Do probówki dodaje się surowicę Anti-Rhesus i ER przemywa roztworem fizycznym, umieszcza w termostacie na 1 godzinę w temperaturze 37 C, po czym dokładnie przemywa ER. Kolejny etap reakcji odbywa się na płaszczyźnie. Kropla zawiesiny ER jest mieszana z równą ilością surowicy antyglobulinowej i wynik jest brany pod uwagę. Obecność aglutynacji jest wskaźnikiem, że badana próbka krwi jest Rh-dodatnia. Jeśli nie ma aglutynacji, Rh ujemne.

4. Reakcja z przeciwciałami anty-D-monoklonalnymi Na płytce miesza się dużą kroplę (0,1 ml) przeciwciał anty-D-monoklonalnych i małą kroplę (0,01 ml) badanej krwi. Reakcję monitoruje się przez 3 minuty. Gdy anty-D-MKA miesza się z próbkami Rh-dodatnimi ER, odnotowuje się szybki początek aglutynacji płatków. Jeśli krew jest Rh ujemna, nie ma aglutynacji.

16. Transfuzja krwiKrew jest jedną z tkanek organizmu, dlatego transfuzję krwi od jednej osoby do drugiej można uznać za operację przeszczepu tkanki.

Mechanizm działania przetoczonej krwi Przetoczona krew oddziałuje na elementy odbioru nerwowego, enzymatyczne i hormonalne układy metaboliczne, zmieniając ją na wszystkich poziomach: od molekularnego do narządu. Przetaczana krew ma następujący wpływ na organizm biorcy:

• substytucyjne (zastąpienie części krwi utraconej przez organizm) • hemodynamiczne (u pacjentów z ostrą utratą krwi i wstrząsem pourazowym prowadzi do uporczywego wzrostu BCC, zwiększenia przepływu żylnego do prawego serca, przyspieszenia serca i zwiększenia minimalnej objętości krwi. immunologiczne (ze względu na wprowadzenie granulocytów, makrofagów, limfocytów, składników dopełniacza, Ig, cytokin) • hemostatyczne; • stymulujące (wzrasta podstawowa przemiana materii, zwiększa się współczynnik oddychania, zwiększa się wymiana gazowa).

Ta strona była ostatnio modyfikowana 2016-09-18; Naruszenie praw autorskich do strony

Metody określania grupy krwi

Każda osoba powinna pamiętać swoją grupę krwi. Może się to nieoczekiwanie przydać w nagłych przypadkach. Nie bez powodu żołnierze mają grupę krwi na tunikach lub żetonach. Nie ma problemu z określeniem grupy krwi. W dużych szpitalach zajmują się tym laboratoria. Ale nawet w małych wiejskich przychodniach istnieją standardowe zestawy do określenia grupy, a wszyscy lekarze i ratownicy medyczni są w stanie przeprowadzić analizę. Nie musisz robić tego samodzielnie, gdy są specjaliści.

Jaką grupę krwi dziecka mogą przyjąć rodzice. Na przykład wiedząc, że rodzice mają drugie, trzecie lub czwarte dziecko, nie licz na to, że dziecko będzie miało pierwsze.

Wskazówki dotyczące definicji domu

Takich porad udzielają ludzie, którzy „żyją” w Internecie i zbierają bezkrytycznie wszelkie informacje. Czasami zmieniają to na swój sposób.

Rzeczywiście istnieje teoria żywienia w zależności od rodzaju krwi i podjęto próby połączenia z nią charakteru osobowości. Ale został opracowany, aby wybrać najbardziej odpowiednią dietę, zapobiegać chorobom. Nawet psychologowie przestali mówić o związku między typem osobowości a liczbą krwi.

Co więcej, nie możesz oceniać swoich ulubionych potraw lub skłonności do przywództwa w swojej grupie..

W domu naucz się czegoś lepszego z pełnowartościowych artykułów, porad ekspertów. Mogą istnieć dokumenty medyczne (karta ambulatoryjna, wypis ze szpitala), które zawierają informacje o twojej krwi.

Na prośbę dawców i pacjentów szpitali można opatrzyć paszport tą informacją.

Kto wynalazł grupy krwi

Pionierem czterech grup krwi jest austriacki naukowiec i lekarz K.Landsteiner, który w 1930 roku otrzymał za to Nagrodę Nobla w dziedzinie medycyny. Odkrycie umożliwiło zapobieganie zgonom z powodu transfuzji, wstępne zbadanie zgodności znaków dawcy i biorcy.

Istotą proponowanego systemu AB0 jest obecność struktur antygenowych na erytrocytach u ludzi i zwierząt. W osoczu nie ma typowych przeciwciał (gammaglobulin) przeciwko nim. Dlatego do określenia można zastosować reakcję antygen + przeciwciało.

Adhezja czerwonych krwinek następuje podczas spotkania antygenu z jego przeciwciałem. Ta reakcja nazywa się hemaglutynacją. Jest widoczny, gdy jest analizowany jako małe płatki. Określenie grupy krwi polega na uzyskaniu obrazu aglutynacji typowymi surowicami.

Antygeny erytrocytów typu „A” wiążą się z przeciwciałami „ά”, odpowiednio „B” i „β”. W zależności od składu krwi wyróżnia się:

  • I lub 0 (ά, β) - w ogóle nie ma antygenów na powierzchni erytrocytów;
  • II lub A (β) - zawierają antygen A z przeciwciałem β;
  • III lub B (ά) - istnieje antygen typu B z przeciwciałem ά;
  • IV lub AB (00) - ma oba antygeny, ale nie zawiera przeciwciał.

Antygeny są obecne w zarodku ludzkim już w okresie embrionalnym, a przeciwciała (aglutyniny) pojawiają się w surowicy noworodków w pierwszym miesiącu życia.

Standard oznaczania grup krwi (metoda prosta)

Do przeprowadzenia analizy grupy krwi potrzebne są erytrocyty pacjenta (pobrane z kropli krwi) oraz standardowe surowice zawierające znane antygeny.

Na płaskiej płytce umieść dużą kroplę czterech surowic w dwóch rzędach (tylko III i II są wystarczające, ale 1 i 1 V są brane jako kontrola). Używając różnych szklanych pręcików (wygodnie jest używać pipet do oczu), krew testową dodaje się do kropli surowicy (stosunek powinien wynosić około 1:10) i delikatnie wymieszaj.

Potrząsaj płytką przez pięć minut, pozwalając serum dobrze wymieszać się z krwią..

Dekodowanie wyników

Po 5 minutach możesz ocenić wyniki analizy. W dużych kroplach serum następuje oświecenie, w niektórych powstają małe płatki (reakcja aglutynacji), w innych nie. Oto opcje:

  • jeśli nie ma aglutynacji w obu próbkach z surowicami z grup III i II (+ kontrola 1 i 1V) - jest to pierwsza grupa;
  • jeśli krzepnięcie jest odnotowane we wszystkich z wyjątkiem II, oznacza to drugą grupę;
  • w przypadku braku aglutynacji tylko z surowicą III ustala się trzecią grupę krwi;
  • jeśli krzepnięcie jest odnotowane we wszystkich próbkach, w tym w kontroli 1V - grupa czwarta.

Kiedy surowice są ułożone we właściwej kolejności, podpisy są umieszczane na płytce, jest łatwa w nawigacji: tam, gdzie nie ma aglutynacji, taka grupa.

Są chwile, kiedy klejenie nie jest wyraźnie widoczne. Następnie analizę przeprowadza się ponownie, niewielką aglutynację obserwuje się pod mikroskopem.

Metoda reakcji krzyżowej

Aby wyjaśnić grupę z niewyrażoną aglutynacją, stosuje się metodę podwójnej reakcji krzyżowej ze standardowymi erytrocytami. W tym przypadku znane są nie surowice, jak w prostej metodzie, ale erytrocyty. Krew pacjenta jest pobierana do probówki, odwirowywana, a surowica jest wypompowywana z góry za pomocą pipety do badania.

Na płaską białą płytkę wkrapla się 2 duże krople surowicy pacjenta. Dodaje się do nich standardowe erytrocyty z grup krwi A (II) i B (III). Mieszaj stopniowo, potrząśnij talerzem.

Wynik szacuje się po 5 minutach:

  • jeśli aglutynacja wystąpiła w obu kroplach, pierwsza grupa;
  • jeśli nie jest w żadnej próbie, czwartą grupę;
  • jeśli w jednym ze znanych użytych erytrocytów, grupę określa się na podstawie obecności lub braku koagulacji w kropli.

Określenie grupy przez zoliclony

Cyklony to syntetyczne substytuty serwatki. Zawierają sztuczne substytuty aglutynin ά i β. Nazywa się je erythrotest Tsoliklon anty-A (różowy) i anty-B (niebieski). Oczekiwana aglutynacja zachodzi między erytrocytami badanej krwi a aglutyninami tsoliclonów.

Technika nie wymaga użycia dwóch serii, jest uważana za dokładniejszą i bardziej niezawodną. Przeprowadzanie i ocena wyników jest takie samo, jak w przypadku prostej metody standardowej.

Rodzaj tsoliclonówGrupa krwi
Wynik aglutynacjiAnti-AAnti-B
--0 (I)
+-A (II)
-+B (III)
++AB (IV)

Cecha: czwarta grupa AB (IV) jest koniecznie potwierdzona reakcją aglutynacji ze specyficznym tsoliclonem „anty-AB” i brakiem niespecyficznej adhezji erytrocytów w izotonicznym roztworze chlorku sodu.

Metoda ekspresowa przy użyciu zestawu „kart Erythrotest-group”

Metoda pozwala na określenie grupy i czynnika Rh w laboratorium iw terenie. W zestawie karta z otworami. Wysuszone odczynniki są już nakładane na dno dołków. Tutaj oprócz „anty-A”, „anty-B” i „anty-AB” użyto „anty-D”, co daje wynik współczynnika Rh.

Możesz użyć krwi w dowolnej postaci, odpowiednia jest kombinacja ze środkiem konserwującym i pobrana z palca.

Przed badaniem na karcie zapisywane jest nazwisko pacjenta, do każdego dołka dodaje się kroplę wody w celu rozpuszczenia składników. Następnie osobnymi pałeczkami dodaje się krew do dołków z odczynnikami i lekko miesza. Końcowy wynik jest „odczytywany” po trzech minutach.

Grupa krwi jest zawsze sprawdzana ponownie, gdy konieczna jest transfuzja. Grupa kontrolna i indywidualna kompatybilność w tym samym czasie. W rzeczywistości w ludzkiej krwi znajduje się znacznie więcej właściwości antygenowych niż w układzie AB0. Po prostu przejawiają się słabo u większości populacji..

Ale u pacjenta z poważnymi chorobami, które zmieniają właściwości krwi i uczulają organizm, stają się one decydujące, wymagają liczenia się z obecnością i poziomem we krwi. Dlatego wiedza pacjenta na temat własnej grupy w wyniku badania dodaje pewności siebie..

Krzyżowe oznaczanie grup krwi (przy użyciu standardowych surowic i standardowych erytrocytów)

I. Zgodnie z wcześniej wykonanymi oznaczeniami na płytkę nanosi się jedną dużą kroplę (0,1 ml) standardowych surowic z grup 0αβ (I), Aβ (II) i Bα (III). Ponieważ stosowane są standardowe surowice z dwóch różnych serii z każdej grupy, uzyskuje się łącznie 6 kropli, które tworzą dwa rzędy po 3 krople w następującej kolejności od lewej do prawej: 0αβ (I), Aβ (II) i Bα (III).

II. W dolnej części płytki nanosi się również jedną małą (0,01 ml) kroplę standardowych erytrocytów pod odpowiednimi oznaczeniami w następującej kolejności od lewej do prawej: 0 (I), A (11) i B (III).

III. Z probówki zawierającej krew pacjenta pobiera się pipetą (ostrożnie, aby nie wstrząsać erytrocytami) surowicę i jedną dużą kroplę (0,1 ml) dodaje się do przygotowanych erytrocytów wzorcowych. Następnie tą samą pipetą pobiera się erytrocyty badanej krwi z dna probówki i nanosi małą (0,01 ml) kroplą w 6 punktach - po jednej kropli przy każdej kropli przygotowanej standardowej surowicy.

IV. We wszystkich kroplach surowicę dokładnie miesza się z erytrocytami (suchym szklanym pręcikiem), płytkę wstrząsa się, następnie pozostawia na 1 - 2 minuty i ponownie okresowo wstrząsa.

Obserwację przebiegu reakcji prowadzi się przez co najmniej 5 minut. Aglutynacja w kroplach ze standardową surowicą zwykle rozpoczyna się szybko (10 - 30 s). Aglutynacja w kroplach, w których surowica badana jest przez erytrocyty wzorcowe, może nastąpić późno (do końca 5 minuty) ze względu na możliwość niskiego miana aglutynin zawartych w badanej surowicy.

V. W momencie rozpoczęcia aglutynacji, ale nie wcześniej niż po 3 minutach, do tych kropli, w których występuje, dodaje się jedną kroplę (0,05 ml) izotonicznego roztworu chlorku sodu i kontynuuje obserwację podczas kołysania płytki do upływu 5 minut..

„Systemy grupowe ludzkiej krwi i
komplikacje po przetoczeniu krwi ”, M.A. Umnova

MedGlav.com

Medyczny katalog chorób

Grupy krwi. Określenie grupy krwi i czynnika Rh.

GRUPY KRWI.


Liczne badania wykazały, że we krwi mogą występować różne białka (aglutynogeny i aglutyniny), których połączenie (obecność lub brak) tworzy cztery grupy krwi.
Każda grupa otrzymuje symbol: 0 (I), A (II), B (III), AB (IV).
Ustalono, że przetaczać można tylko krew z tej samej grupy. W wyjątkowych przypadkach, gdy nie ma krwi z jednej grupy, a transfuzja jest niezbędna, dopuszczalna jest transfuzja krwi z innej grupy. W tych warunkach krew z grupy 0 (I) może być przetaczana pacjentom z dowolną grupą krwi, a pacjenci z krwią AB (IV) mogą być przetaczani krwią dawcy z dowolnej grupy.

Dlatego przed rozpoczęciem transfuzji krwi konieczne jest dokładne ustalenie grupy krwi pacjenta oraz przetoczonej grupy krwi..

Określenie grupy krwi.


Do określenia grupy krwi stosuje się standardowe surowice z grup 0 (I), A (II), B (III), które są specjalnie przygotowywane w laboratoriach stacji transfuzji krwi.
Na białej płytce w odległości 3-4 cm od lewej do prawej umieść cyfry I, II, III, oznaczające standardowe surowice. Kroplę standardowej surowicy grupy 0 (I) nanosi się pipetą na sektor płytki, oznaczony numerem I; następnie drugą pipetą nanosi się kroplę surowicy z grupy A (II) pod numerem II; weź również surowicę B (III) z grupy i trzecią pipetą aplikuj pod numerem III.

Następnie pacjenta nakłuwa się palcem, a płynącą krew przenosi się szklanym prętem do kropli surowicy na płytce i miesza do równomiernego zabarwienia. Do każdej surowicy krwi dodaje się nowy sztyft. Po 5 minutach od momentu wybarwienia (co godzinę!), Grupę krwi określa zmiana w mieszaninie. W surowicy, w której zachodzi aglutynacja (adhezja erytrocytów), widoczne są wyraźnie czerwone ziarna i grudki; w surowicy, gdzie nie zachodzi aglutynacja, kropla krwi pozostanie jednorodna, o równomiernym zabarwieniu różowym.

W zależności od grupy krwi pacjenta, w niektórych próbkach wystąpi aglutynacja. Jeśli pacjent ma grupę krwi 0 (I), wówczas sklejanie erytrocytów z jakąkolwiek surowicą nie nastąpi.
Jeśli podmiot ma grupę krwi A (II), to nie będzie aglutynacji tylko z surowicą z grupy A (II), a jeśli podmiot ma grupę B (III), to nie będzie aglutynacji z surowicą B (III). Aglutynację obserwuje się we wszystkich surowicach, jeśli badana krew należy do grupy AB (IV).

Czynnik Rh.


Czasami nawet przy transfuzji krwi z tej samej grupy obserwuje się ciężkie reakcje. Badania wykazały, że około 15% ludzi nie ma we krwi specjalnego białka, tak zwanego czynnika Rh..

Jeśli tym ludziom będzie się powtarzać transfuzje krwi zawierającej ten czynnik, wystąpi poważne powikłanie zwane konfliktem Rh i wystąpi szok. Dlatego obecnie wszyscy pacjenci są zobowiązani do określenia czynnika Rh, ponieważ tylko krew Rh ujemna może być przetaczana biorcy z ujemnym czynnikiem Rh..

Przyspieszony sposób określania przynależności Rh. Na szklaną płytkę Petriego nanosi się 5 kropli surowicy przeciw rezusowi z tej samej grupy co biorca. Kropla krwi podmiotu jest dodawana do surowicy i dokładnie mieszana. Szalkę Petriego umieszcza się w łaźni wodnej o temperaturze 42-45 ° C. Wyniki reakcji ocenia się po 10 minutach. Jeśli wystąpi aglutynacja krwi, pacjent ma krew Rh dodatnią (Rh +); jeśli nie ma aglutynacji, to badana krew jest Rh-ujemna (Rh-).
Opracowano szereg innych metod oznaczania czynnika Rh, w szczególności z użyciem uniwersalnego odczynnika D anty-Rh.

Obowiązkowe jest określenie grupy krwi i przynależności Rh do wszystkich pacjentów w szpitalu. Wyniki badania należy wpisać do paszportu pacjenta.

Metoda krzyżowa określania grupy krwi według systemu AVO

Procedura oznaczania grup krwi systemem ABO polega na wykrywaniu antygenów A i B w erytrocytach przy użyciu standardowych przeciwciał i zastosowaniu aglutynin w osoczu lub surowicy analizowanej krwi ze standardowymi erytrocytami. Technika została opracowana na początku XX wieku i nadal jest aktywnie stosowana w medycynie. Oznaczanie antygenów A i B odbywa się dzięki tsoliclonom anty-A i anty-B.

U dawców zawsze określa się nie tylko antygeny w erytrocytach, ale także aglutyniny w surowicy (osoczu) przy użyciu standardowych erytrocytów. Jako biomateriał stosuje się krew żylną. Przed badaniem należy na dzień przed analizą zrezygnować z tłustych potraw i nie palić przez pół godziny przed wykonaniem testu. Grupy krwi określa się dwukrotnie: najpierw na oddziale medycznym, gdzie pozyskuje się materiał, a następnie potwierdza się badaniami w laboratorium.

Oznaczanie grup krwi systemem ABO jest głównym testem stosowanym w medycynie transfuzyjnej. Niektóre zwierzęta mają również podobny system grup krwi, na przykład szympansy, goryle i bonobo..

W nauce panuje ogólnie przyjęta opinia, że ​​metodę określania grup krwi według systemu ABO po raz pierwszy zidentyfikował austriacki naukowiec Karl Landsteiner w 1900 roku. Następnie opisał w swojej pracy trzy rodzaje antygenów. Za to trzydzieści lat później otrzymał Nagrodę Nobla w dziedzinie medycyny i fizjologii. W związku z tym, że wcześniej nie istniały bliskie więzi między naukowcami, później ustalono, że czeski serolog Jan Jansky, niezależnie od badań K. Landsteinera, jako pierwszy opisał cztery grupy krwi ludzkiej, ale jego badania nie były znane szerokiemu gronu odbiorców. Obecnie jest to klasyfikacja opracowana przez Y. Yansky'ego, która jest stosowana w Rosji i republikach byłego ZSRR. W USA W.L. Moss stworzył podobne dzieło w 1910 roku.

Grupę krwi należy określić w pomieszczeniu z dobrym oświetleniem, z zachowaniem zakresu temperatur od 15 do 25 stopni Celsjusza, gdyż odchylenia od tej normy mogą wpływać na wyniki badań. Na tabliczce lub tabliczce wypisane są inicjały i nazwisko pacjenta. Od lewej do prawej lub w kółku stosowane są standardowe oznaczenia grup (O (I), A (II), B (III)). Pod nimi kropla po kropli umieszcza się odpowiednią surowicę z oddzielnymi pipetami dla każdego typu. Następnie dodaje się do nich krew pacjenta. Materiał do badań pobierany jest z płatka ucha lub palca. Jest to wymagane przez technikę określania grupy krwi zgodnie z systemem ABO.

Legalne jest również użycie czerwonych krwinek w probówce po utworzeniu skrzepu. Ilość surowicy musi być dziesięciokrotnie większa od ilości dodanej krwi. Następnie krople miesza się ze szklanymi prętami (osobno dla każdego). W ciągu pięciu minut delikatnie potrząsając płytką obserwuj pojawienie się reakcji hemaglutynacji. Okazuje się, że pojawiają się małe czerwone grudki, a następnie łączą się w większe. W tym czasie serum prawie całkowicie traci kolor..

Aby wyeliminować fałszywą hemaglutynację poprzez proste sklejanie erytrocytów, po trzech minutach dodaj jedną kroplę soli fizjologicznej i sprawdź, czy aglutynacja nie ustąpi. Jeśli tak, to prawda. To wszystko, definicja grup krwi według systemu ABO jest teraz kompletna.

W rezultacie można zaobserwować cztery reakcje:

  • w żadnej z surowic nie występuje aglutynacja - pierwsza grupa to O (I);
  • reakcja objawiała się z surowicami I (ab) i III (a) - druga grupa A (II);
  • aglutynacja zachodzi w surowicach I (ab) i II (b) - trzecia grupa B (III);
  • jeśli reakcja zachodzi z trzema surowicami, konieczne jest przeprowadzenie dodatkowej procedury z odczynnikami z grupy AB (IV), które są standardem; jeśli w takiej kropli nie ma aglutynacji, możemy przyjąć, że jest to 4. grupa krwi AB (IV).

Metoda określania grup krwi według systemu ABO polega na jednoczesnym wykryciu czynnika Rh (Rh).

Powierzchnia płytki jest wstępnie nawilżona i wypisane na niej „serum kontrolne” i „serum przeciw rezusowi”. Następnie pod napisy umieszcza się jedną lub dwie krople wymaganych odczynników i dodaje do nich analizowany materiał. W tym celu można również użyć krwi z palca (w takiej samej ilości jak objętość surowicy) lub erytrocytów pozostających na dnie probówki po pojawieniu się skrzepu (połowa objętości surowicy). Wybór materiału nie wpływa na efekt końcowy. Następnie krew i surowicę miesza się suchym szklanym pręcikiem, po czym oczekuje się, że reakcja potrwa pięć minut. Aby wyeliminować fałszywe odczyty, izotoniczny roztwór chlorku sodu dodaje się po trzech do czterech minut (zaledwie kilka kropli). Oznaczanie grupy krwi według systemu ABO i Rh przeprowadza się bardzo często.

Jeśli dojdzie do aglutynacji erytrocytów w spadku surowicy, oznacza to dodatnią krew Rh. Według statystyk Rh + występuje u 85% światowej populacji. Jej brak pozwala mówić o przynależności Rh-ujemnej. Jeśli w surowicy kontrolnej pojawi się aglutynacja, stała się bezużyteczna. Niestety algorytm określania grupy krwi ABO nie zawsze działa idealnie.

Niedokładności w określaniu przynależności krwi do określonej grupy zależą od następujących przyczyn:

  • Techniczny.
  • Specyfika biologiczna badanej krwi.
  • Wadliwy charakter standardowych surowic i erytrocytów.

Możliwe błędy w określaniu grupy krwi systemu ABO w sposób krzyżowy:

  • Serum niewłaściwie umieszczone na talerzu.
  • Nieprawidłowe ilościowe proporcje materiału.
  • Stosowanie niedostatecznie czystych płytek lub płytek, które mają kontakt z krwią (każdą surowicę należy pobrać osobną pipetą, którą należy przemyć roztworem chlorku sodu (o stężeniu 0,9%)).
  • Błędny zapis analizowanego materiału.
  • Nieprzestrzeganie czasu wymaganego do wystąpienia aglutynacji - nie należy się spieszyć i brać pod uwagę reakcję przed upływem pięciu minut, ponieważ we krwi mogą znajdować się słabe aglutynogeny. Prześwietlenie też nie jest tego warte, ponieważ krople mogą wysychać z krawędzi i prowadzić do fałszywego wniosku. Ważne jest przestrzeganie zasad określania grupy krwi zgodnie z systemem ABO.
  • Nieprawidłowe wirowanie może również prowadzić do fałszywych wyników..
  • Temperatura powietrza przekraczająca dopuszczalną wartość wpływa na brak aglutynacji. Aby uniknąć tego typu błędów, musisz użyć specjalnego serum przeznaczonego do pracy w gorącym klimacie. Musisz określić grupy krwi na talerzu lub talerzu, którego zewnętrzna powierzchnia jest zanurzona w zimnej wodzie.

Błędy związane z biologiczną specyfiką analizowanej krwi dzielą się na dwa rodzaje.

  • W zależności od cech erytrocytów.
  • Błędy wynikające z biologicznych właściwości surowicy.

Rozważmy bardziej szczegółowo każdy typ.

  • Późna aglutynacja z powodu „słabych” form erytrocytów i antygenów. Aby uniknąć błędów, konieczne jest określenie grupy krwi dawców i biorców przy użyciu standardowych erytrocytów. Zidentyfikuj aglutynogen A.2 należy ponownie zbadać z innymi rodzajami odczynników i innymi narzędziami, wydłużając czas rejestracji reakcji.
  • „Panaglutynacja” („autoaglutynacja”) - zdolność krwi do wykazywania tej samej niespecyficznej reakcji ze wszystkimi surowicami, łącznie z jej własną. Po pięciu minutach nasilenie takiej aglutynacji słabnie, chociaż powinno wzrosnąć. Podobne przypadki obserwuje się u chorych na nowotwory, oparzenia itp. Jako kontrolę należy ocenić manifestację aglutynacji badanych erytrocytów w standardowej surowicy czwartej grupy i soli fizjologicznej. W przypadku „panaglutynacji” grupa krwi jest określana w wyniku potrójnego przemycia erytrocytów. Jeśli nie da to pożądanego rezultatu, warto ponownie pobrać próbkę krwi do probówki ogrzanej przed zabiegiem i umieścić próbkę w pojemniku termicznym, aby pomóc utrzymać temperaturę 37 stopni Celsjusza i wyższą. Następnie należy go zabrać do laboratorium, w którym utrzymuje się powyższą temperaturę i użyć podgrzanego roztworu soli, płytki i odczynników.
  • Czasami erytrocyty analizowanej krwi są ułożone jak „kolumny monet” i można je pomylić z aglutynatami. Jeśli dodasz dwie krople roztworu izotonicznego i delikatnie potrząśniesz tabletką, czerwone krwinki znajdą się we właściwej pozycji.
  • Niecałkowita lub mieszana aglutynacja występująca u pacjentów z drugą, trzecią i czwartą grupą w wyniku przeszczepu szpiku kostnego lub w pierwszych trzech miesiącach po transfuzji krwi 0 (I).
  • Podczas rutynowych badań w wyniku wcześniejszego uczulenia wykrywane są przeciwciała o innej specyficzności. Konieczne jest jego oznaczenie i pobranie erytrocytów bez zawartości antygenu, na który wykryto immunizację. Odbiorca musi upewnić się, że indywidualnie wybrał zgodną krew dawcy.
  • Nie ma przeciwciał A i B, co obserwuje się u noworodków i pacjentów cierpiących na zahamowanie odporności humoralnej.
  • W przypadku tworzenia się „kolumn monet”, nieprawidłowy wynik należy potwierdzić, pobierając wzorcowe erytrocyty z pierwszej grupy. Roztwór chlorku sodu i wstrząsarka do płytek pomagają odróżnić prawdziwe aglutynaty od stosów monet.

Słabe surowice z datą ważności lub o mianie mniejszym niż 1:32 mogą powodować słabą i późną aglutynację. Stosowanie takich odczynników jest niedopuszczalne..

Użycie bezużytecznych standardowych erytrocytów lub surowic przygotowanych w niesterylnych warunkach i niedostatecznie konserwowanych prowadzi do pojawienia się „bakteryjnej” aglutynacji o niespecyficznej naturze..

Istnieje wiele popularnych przypuszczeń dotyczących grup krwi układu ABO, które pojawiły się zaraz po jego odkryciu w różnych kulturach świata. Na przykład w latach 30. ubiegłego wieku w Japonii i niektórych innych krajach popularność zyskała teoria łącząca grupę krwi z określonym typem osobowości. Podobne teorie są dziś popularne..

Istnieje również opinia, że ​​osoba z grupą A jest podatna na ciężkiego kaca, O kojarzy się z dobrymi zębami, a grupa A2 ma najwyższe IQ. Ale takie twierdzenia nie zostały naukowo udowodnione..

Przeanalizowaliśmy oznaczanie grup krwi zgodnie z systemem ABO przy użyciu standardowych surowic.

Na podstawie materiałów z fb.ru

Metodę najczęściej stosuje się w laboratoriach serologicznych. Istotą metody jest określenie obecności lub braku antygenów grupowych A i B w badanej krwi przy użyciu standardowych surowic izohemaglutynujących, a także przeciwciał grupowych α i β przy użyciu standardowych erytrocytów. Reakcję ze standardowymi surowicami przeprowadza się jak opisano powyżej..

Reakcję ze standardowymi erytrocytami przeprowadza się w następujący sposób.

Sprzęt do reakcji ze standardowymi erytrocytami różni się tym, że wymaga standardowych erytrocytów z trzech grup krwi: 0 (I), A (II), B (III). Standardowe erytrocyty przygotowuje się z krwi dawców o znanej wcześniej grupie krwi, przechowywanej w temperaturze 4-8 ° C. Trwałość 2-3 dni.

Metoda reakcji

1. Krew do badań pobierana jest z żyły do ​​suchej probówki, odwirowywana lub pozostawiana sama na 20-30 minut w celu uzyskania surowicy.

2. Na oznaczoną płytkę pipetą nanieść trzy duże krople (0,1 ml) surowicy krwi badanej z probówki, a obok nich jedną małą kroplę (0,01 ml) standardowych erytrocytów grup.

3. Dalsze pomiary przeprowadza się podobnie jak w metodzie z użyciem standardowych surowic izohemaglutynujących: odpowiednie krople miesza się z pręcikami szklanymi, tabletkę wstrząsa, obserwuje przez 5 minut, do kropli dodaje się izotoniczny roztwór chlorku sodu z aglutynacją, po czym ocenia się wynik.

Tabela 6-3. Ocena wyników oznaczania grupy krwi metodą krzyżową

Oceń dane uzyskane w obu reakcjach (ze standardowymi surowicami izohemaglutynującymi i standardowymi erytrocytami - Tabela 6-3).

Specyfika interpretacji wyników reakcji ze standardowymi erytrocytami - erytrocyty z grupy 0 (I) są uważane za kontrolę (nie zawierają antygenów, co zasadniczo uniemożliwia specyficzną reakcję aglutynacji z jakąkolwiek surowicą).

Wynik metody cross-over jest uznawany za wiarygodny tylko wtedy, gdy przy ocenie wyników reakcji ze standardowymi surowicami izohemaglutynującymi i standardowymi erytrocytami odpowiedzi dotyczące grupy badanej krwi pokrywają się. Jeśli tak się nie stanie, obie reakcje należy powtórzyć.

Do określenia grupy krwi, dla której stosowana jest biotechnologia hybrydomy, stosuje się przeciwciała monoklonalne.

Hybrydoma jest hybrydą komórkową utworzoną przez fuzję komórki nowotworowej szpiku kostnego (szpiczaka) z limfocytem odpornościowym, który syntetyzuje specyficzne przeciwciała monoklonalne. Hybrydoma nabywa właściwości obojga „rodziców”: zdolność do nieograniczonego wzrostu, charakterystyczną dla komórki nowotworowej, oraz zdolność do syntezy przeciwciał nieodłączną dla limfocytów odpornościowych.

Tabela 6-4. Schemat oceny wyników oznaczania grup krwi za pomocą przeciwciał monoklonalnych (tsoliclony anty-A i anty-B)

Opracowano standardowe odczynniki - przeciwciała monoklonalne: tsoliclony anty-A i anty-B, służące do oznaczania aglutynogenów erytrocytów.

Tsolyclones stosuje się w postaci liofilizowanego proszku koloru czerwonego (anty-A) lub niebieskiego (anty-B), proszek rozcieńcza się izotonicznym roztworem chlorku sodu bezpośrednio przed badaniem.

Technika reakcji

Cyklony anty-A i anty-B nanosi się na białą płytkę w jednej dużej kropli (0,1 ml) pod odpowiednimi etykietami: anty-A i anty-B. Obok nich nanosi się jedną małą kroplę (0,01 ml) badanej krwi. Po zmieszaniu składników obserwuje się reakcję aglutynacji przez 2-3 minuty..

Ocena wyników jest bardzo prosta (tabela 6-4).

Metoda określenia grupy krwi za pomocą tsoliclonów pozwala zrezygnować ze standardowych surowic izohemaglutynujących uzyskiwanych z krwi dawcy.

Na podstawie materiałów ze studfiles.net

13. Metody ustalania przynależności do grupy. Metoda krzyżowa określania grup krwi według systemu „avo”, jej przeznaczenie.

Zobacz poprzednie metody. Vopr. (surowice izohemaglutynujące, erytrocyty standardowe, tsoliclony)

Crossover - nigdzie nie określamy zarówno antygenów, jak i przeciwciał

Obraz kliniczny i rozpoznanie krwawienia do światła przewodu pokarmowego.

Krwawienie z przewodu pokarmowego jest poważnym powikłaniem chorób przewodu pokarmowego (najczęściej wrzodami żołądka i dwunastnicy). W przypadku krwawienia krew wpływa do światła przewodu żołądkowo-jelitowego (jamy żołądka i jelit). Objętość utraty krwi może być bardzo poważna (do 3-4 litrów) i zagrażać życiu pacjenta.

Objawy krwawienia z przewodu pokarmowego

Objawy krwawienia z przewodu pokarmowego zależą od źródła i ilości utraconej krwi..

Krwawe wymioty. Krew w wymiocinach może być:

niezmienione (z krwawieniem z żołądka, żylakami przełyku, z nadżerkami (wady powierzchniowe błony śluzowej) przełyku);

zmieniony (podczas interakcji z kwasem solnym żołądka krew staje się brązowa). Wymioty „jak fusy z kawy” (brązowe) są charakterystyczne: z krwawieniem z wrzodów żołądka lub dwunastnicy, z zespołem Mallory'ego-Weissa - krwawienie z pęknięć błony śluzowej żołądka.

W przypadku krwawienia z dolnego odcinka przewodu pokarmowego wymioty nie są typowe.

Stolec z krwią. Krew w stolcu może być również:

niezmienione (z jednostopniową utratą krwi powyżej 100 ml z krwawieniem z wrzodu żołądka lub dwunastnicy, a także z dolnych odcinków przewodu żołądkowo-jelitowego);

zmienione (z przedłużającym się krwawieniem z górnego odcinka przewodu pokarmowego). Po 4-6 godzinach od wystąpienia krwawienia pojawiają się smoliste czarne stolce (melena). W przypadku utajonego krwawienia wrzodziejącego, melena może być jedynym objawem krwawienia. Jeśli źródło krwawienia znajduje się w żołądku, małych lub początkowych częściach jelita grubego, wówczas krew jest zwykle równomiernie mieszana z kałem, z krwawieniem z odbytnicy znajduje się w oddzielnych skrzepach na tle niezmienionego kału.

Typowe objawy utraty krwi:

Nasilenie tych objawów zależy od stopnia utraty krwi i może wahać się od łagodnego złego samopoczucia i zawrotów głowy (z gwałtowną zmianą pozycji ciała) po głębokie omdlenia i śpiączkę (trwała utrata przytomności). W przypadku przewlekłego krwawienia występują oznaki niedokrwistości (niedokrwistość):

bladość skóry i błon śluzowych;

pogorszenie ogólnego stanu zdrowia;

ostre i przewlekłe krwawienie;

oczywiste i utajone krwawienie;

pojedyncze i nawracające (powtarzające się) krwawienie.

W zależności od źródła krwawienia wyróżnia się kilka postaci choroby..

Krwawienie z górnego odcinka przewodu pokarmowego:

dwunastnica (z dwunastnicy).

Krwawienie z dolnego odcinka przewodu pokarmowego:

Nasilenie utraty krwi może być:

Rozpoznanie krwawienia z przewodu pokarmowego opiera się na:

analiza wywiadu choroby i dolegliwości (kiedy wystąpiły objawy choroby, z którymi pacjent wiąże ich wygląd i rozwój);

anamneza życia (przeszłe choroby, złe nawyki, dziedziczność);

badanie kliniczne. Oprócz badania ogólnego konieczne jest badanie doodbytnicze (badanie odbytnicy) w przypadku krwawienia z przewodu pokarmowego. Pomaga zidentyfikować charakterystyczne zmiany w zabarwieniu kału, aw przypadku krwawienia ze szczeliny odbytu lub hemoroidów, wykryć źródło krwawienia;

ogólne badanie krwi - pomaga zidentyfikować zmniejszenie liczby czerwonych krwinek i hemoglobiny, charakterystyczne dla krwawienia;

analiza kału pod kątem krwi utajonej - pomaga wykryć ślady krwi w kale, jeśli ilość utraconej krwi była niewystarczająca do zmiany jej koloru;

badanie krwi na obecność płytek krwi (krwawienie związane z zaburzeniem krzepnięcia);

koagulogramy (badanie krwi, które odzwierciedla szybkość i jakość procesu krzepnięcia krwi);

badanie endoskopowe. W przypadku krwawienia z górnego odcinka przewodu pokarmowego konieczne jest FEGDS (fibroesophagogastroduodenoscopy).

Badanie przeprowadza się za pomocą aparatu endoskopowego, który jest wprowadzany do jamy ustnej pacjenta pod okiem lekarza. Podczas badania endoskopowego oprócz wykrycia źródła krwawienia można wykonać zabiegi medyczne mające na celu zahamowanie krwawienia - koagulację (kauteryzację) lub obcinanie (założenie metalowych zamków) uszkodzonych naczyń (źródła krwawienia). Jeśli źródło krwawienia zlokalizowane jest w jelicie grubym, stosuje się sigmoidoskopię (badanie instrumentalne odbytnicy i esicy) lub kolonoskopię (badanie endoskopowe okrężnicy za pomocą kolonoskopu - aparatu, za pomocą którego bada się błonę śluzową jelita grubego), które również mogą być diagnostyczne procedury medyczne.

Klinika ostrego krwawienia i utraty krwi. Sposoby zwalczania ostrej utraty krwi.

Klasyczne objawy krwawienia to:

• blada, wilgotna skóra;

• zawroty głowy, zwłaszcza podczas podnoszenia głowy;

• „ciemne oczy”, „leci” przed oczami;

Obiektywne dane badawcze:

• bladość skóry, zimne poty, akrocyjanoza;

• letarg i inne zaburzenia świadomości;

• tachykardia, nitkowaty puls;

Oznaki utraty krwi: bladość i wilgotność skóry, zapadnięta twarz, szybki i mały puls, przyspieszony oddech, w ciężkich przypadkach, oddychanie typu Cheyne-Stokesa, obniżenie CVP i ciśnienia krwi. Subiektywne objawy: zawroty głowy, suchość w ustach, pragnienie, nudności, ciemnienie oczu, narastające osłabienie. Jednak przy powolnym przepływie krwi objawy kliniczne mogą nie odpowiadać ilości utraconej krwi.

Czynniki stymulujące samokontrolę krwawienia. Klasyfikacje krwawienia.

NAJPIERW O HEMOSTAZIE, PAMIĘTAJ MIŁOŚĆ PROPEDA!

Krwawienie (krwotok) - wypływ (wypływ) krwi ze światła naczynia krwionośnego na skutek uszkodzenia lub naruszenia przepuszczalności jego ściany.

• Krwawienie z tętnicy. Krew wypływa szybko, pod ciśnieniem, często w postaci pulsującego strumienia, o jasnym szkarłatnym kolorze. Wskaźnik utraty krwi jest dość wysoki. Wielkość utraty krwi zależy od kalibru naczynia i charakteru uszkodzenia (boczne, całkowite itp.).

• Krwawienie żylne. Ciągłe krwawienie koloru wiśni. Wskaźnik utraty krwi jest niższy niż w przypadku krwawienia tętniczego, ale przy dużej średnicy uszkodzonej żyły może być bardzo znaczący. Tylko wtedy, gdy uszkodzona żyła zlokalizowana jest w pobliżu dużej tętnicy, pulsacja strumienia jest możliwa dzięki pulsacji transmisji. Podczas krwawienia z żył szyi należy być świadomym niebezpieczeństwa zatorowości powietrznej..

• Krwawienie z naczyń włosowatych. Krwawienie mieszane spowodowane uszkodzeniem naczyń włosowatych, małych tętnic i żył. W tym przypadku z reguły cała powierzchnia rany po wyschnięciu jest ponownie pokryta krwią. Takie krwawienie jest zwykle mniej masywne niż w przypadku uszkodzenia większych naczyń..

• Krwawienie miąższowe występuje w wyniku uszkodzenia narządów miąższowych: wątroby, śledziony, nerek, płuc. W rzeczywistości jest to krwawienie włośniczkowe, ale zwykle bardziej niebezpieczne, co wiąże się z anatomicznymi i fizjologicznymi cechami narządów.

Mechanizm występowania

Istnieją trzy rodzaje krwawienia, w zależności od przyczyny:

• Krwotok przez reksynę - krwawienie z powodu mechanicznego uszkodzenia (pęknięcia) ściany naczynia - najczęstszy rodzaj krwawienia

• Krwotok przez diabrozynę - krwawienie podczas nadżerki (zniszczenie, owrzodzenie, martwica) ściany naczynia w wyniku jakiegokolwiek procesu patologicznego. Takie krwawienie występuje podczas procesu zapalnego, próchnicy guza, enzymatycznego zapalenia otrzewnej itp..

• Krwotok per diapedesin - krwawienie z naruszeniem przepuszczalności ściany naczyniowej na poziomie mikroskopowym. Zwiększona przepuszczalność ściany naczyniowej występuje w chorobach takich jak niedobór witaminy C, krwotoczne zapalenie naczyń, przewlekła niewydolność nerek, szkarlatyna, posocznica itp..

Pewną rolę w rozwoju krwawienia odgrywa stan układu krzepnięcia krwi. Samo zakłócenie tworzenia się skrzepliny nie prowadzi do krwawienia, ale znacznie komplikuje sytuację. W przypadku uszkodzenia małej żyły uruchamiany jest system samoistnej hemostazy, ale jeśli stan układu krzepnięcia jest upośledzony, wówczas każdy, nawet najmniej znaczący uraz może prowadzić do śmiertelnego krwawienia. Znane zaburzenie krzepnięcia zwane hemofilią.

W stosunku do środowiska zewnętrznego

Na tej podstawie wszystkie krwawienia dzieli się na dwa główne typy: zewnętrzne i wewnętrzne.

W przypadkach, gdy krew wypływa z rany do środowiska zewnętrznego, mówią o krwawieniu zewnętrznym. Takie krwawienie jest oczywiste i szybko diagnozowane. Krwawienie zewnętrzne obejmuje również krwawienie drenażowe z rany pooperacyjnej..

Krwawienie wewnętrzne nazywane jest krwawieniem, w którym krew dostaje się do światła pustych narządów, tkanek lub wewnętrznych jam ciała. Występuje jawne i ukryte krwawienie wewnętrzne. Wewnętrzne wyraźne krwawienia to takie, w których krew, nawet w zmienionej postaci, pojawia się na zewnątrz po pewnym czasie, dlatego rozpoznanie można postawić bez kompleksowego badania i identyfikacji szczególnych objawów. Na przykład podczas krwawienia z wrzodu żołądka krew dostaje się do jego światła, a gdy jest wystarczająco nagromadzona, pojawiają się wymioty. W kontakcie z kwasem solnym krew w żołądku zmienia kolor i konsystencję - pojawiają się tak zwane wymioty „fusów kawowych”. Jeśli krwawienie nie jest masywne lub wrzód znajduje się w dwunastnicy, krew przechodzi naturalną drogą dla treści jelitowej i wydostaje się przez odbyt w postaci czarnego kału (melena). Do wewnętrznego krwawienia pozornego zalicza się także krwawienie z dróg żółciowych - hemobilia, z nerek i dróg moczowych - krwiomocz.

W przypadku utajonego krwawienia wewnętrznego krew wpływa do różnych ubytków i dlatego nie jest widoczna. Wypływ krwi do jamy brzusznej nazywamy hemoperitoneum, do jamy klatki piersiowej - hemothorax, do jamy osierdziowej - hemopericardium, do jamy stawowej - hemartrosis. Podczas krwawienia do jamy surowiczej fibryna osocza osiada na surowiczej powłoce, wypływająca krew ulega odwłóknieniu i zwykle nie krzepnie.

Do czasu wystąpienia krwawienia może być pierwotne i wtórne.

Wystąpienie pierwotnego krwawienia wiąże się z bezpośrednim uszkodzeniem naczynia podczas urazu. Objawia się natychmiast lub w pierwszych godzinach po uszkodzeniu.

Krwawienie wtórne jest wczesne (zwykle od kilku godzin do 4-5 dni po urazie) i późne (ponad 4-5 dni po urazie).

Istnieją dwie główne przyczyny rozwoju wczesnego krwawienia wtórnego:

• ześlizgnięcie się z naczynia nałożonego ligatury podczas zatrzymywania pierwotnego krwawienia;

• wypłukiwanie skrzepu krwi z naczynia z powodu wzrostu ciśnienia ogólnoustrojowego i przyspieszonego przepływu krwi lub z powodu zmniejszenia spastycznego skurczu naczynia, które występuje podczas ostrej utraty krwi.

Późne krwawienie wtórne, czyli nadżerki, wiąże się ze zniszczeniem ściany naczynia krwionośnego w wyniku rozwoju procesu infekcyjnego w ranie. Takie przypadki są jednymi z najtrudniejszych, ponieważ cała ściana naczyniowa w tym obszarze została zmieniona i w każdej chwili możliwy jest nawrót krwawienia..

Każde krwawienie może być ostre lub przewlekłe. W ostrym krwawieniu krwawienie pojawia się w krótkim okresie czasu, aw przewlekłym krwawieniu występuje stopniowo, w małych porcjach, czasem nieistotnych, okresowe krwawienie obserwuje się przez wiele dni. Przewlekłe krwawienie może dotyczyć wrzodów żołądka i dwunastnicy, nowotworów złośliwych, hemoroidów, mięśniaków macicy itp..

Zmiany w organizmie w przypadku ostrej utraty krwi. Rodzaje krwawień w zależności od czasu jego wystąpienia. Zapobieganie późnemu krwawieniu wtórnemu.

Zmiany w organizmie w przypadku ostrej utraty krwi

Żyły są główną pojemnościową częścią łożyska naczyniowego, zawierają 70-75% BCC. Efekt jadotorowy, który rozwija się wraz z utratą krwi (zwiększonym napięciem żylnym), kompensuje utratę do 10-15% BCC.

Ze względu na hipowolemię, a także z powodu rozwijającego się później objawu niskiego rzutu serca i skurczu tętniczek, ciśnienie hydrostatyczne w naczyniach włosowatych spada, co prowadzi do przedostania się do nich płynu międzykomórkowego. Taki mechanizm w pierwszych 5 minutach z utratą krwi może zapewnić napływ do 10-15% BCC do naczyń..

Rozwój hipowolemii prowadzi do zmniejszenia przepływu żylnego do serca i, odpowiednio, rzutu serca. Rozwijający się tachykardia związana z działaniem układu współczulno-nadnerczowego przez pewien czas pozwala na utrzymanie rzutu serca na normalnym poziomie.

W przypadku hipowolemii stymulowane jest wydzielanie przysadkowego hormonu antydiuretycznego i aldosteronu. Prowadzi to do wzrostu reabsorpcji wody, retencji jonów sodu i chloru, rozwoju skąpomoczu.

Początkowo hiperwentylacja adaptacyjna ma na celu zwiększenie siły ssącej klatki piersiowej i kompensacyjny wzrost przepływu krwi do serca. Wtedy jego rozwój jest w dużej mierze związany ze zmianami metabolicznymi w narządach i tkankach oraz naruszeniem równowagi kwasowo-zasadowej..

Skurcz tętnic obwodowych jest etapem przejściowym między kompensacyjnymi a patologicznymi reakcjami utraty krwi, najważniejszym mechanizmem utrzymania ogólnoustrojowego ciśnienia krwi i dopływu krwi do mózgu, serca i płuc. W przypadkach, gdy te mechanizmy kompensacyjne są wystarczające do utrzymania prawidłowego BCC i ustaje krwawienie, stan wszystkich narządów i układów stopniowo się normalizuje. Jeśli objętość utraty krwi przekracza możliwości kompensacyjne organizmu, pojawia się zespół zaburzeń patologicznych..

Do czasu wystąpienia krwawienia może być pierwotne i wtórne.

Wystąpienie pierwotnego krwawienia wiąże się z bezpośrednim uszkodzeniem naczynia podczas urazu. Objawia się natychmiast lub w pierwszych godzinach po uszkodzeniu.

Krwawienie wtórne jest wczesne (zwykle od kilku godzin do 4-5 dni po urazie) i późne (ponad 4-5 dni po urazie).

Istnieją dwie główne przyczyny rozwoju wczesnego krwawienia wtórnego:

• ześlizgnięcie się z naczynia nałożonego ligatury podczas zatrzymywania pierwotnego krwawienia;

• wypłukiwanie skrzepu krwi z naczynia z powodu wzrostu ciśnienia ogólnoustrojowego i przyspieszonego przepływu krwi lub z powodu zmniejszenia spastycznego skurczu naczynia, które występuje podczas ostrej utraty krwi.

Późne krwawienie wtórne, czyli nadżerki, wiąże się ze zniszczeniem ściany naczynia krwionośnego w wyniku rozwoju procesu infekcyjnego w ranie. Takie przypadki są jednymi z najtrudniejszych, ponieważ cała ściana naczyniowa w tym obszarze została zmieniona i w każdej chwili możliwy jest nawrót krwawienia..

Poniższe główne punkty służą zapobieganiu wtórnemu krwawieniu..

1. Dokładne ostateczne zatrzymanie pierwotnego krwawienia w przypadku uszkodzenia naczyń krwionośnych oraz podczas jakiejkolwiek interwencji chirurgicznej. Przed zaszyciem rany należy dokładnie zbadać obszar interwencji chirurgicznej (sprawdzić hemostazę). Jeśli nie ma pewności co do całkowitego zatrzymania krwawienia, wykonuje się dodatkowe techniki - podwiązanie, elektrokoagulację naczynia, użycie gąbki hemostatycznej. Dopiero przy pełnej hemostazie operacja kończy się zszyciem rany.

2. Dokładne przeprowadzenie pierwotnego chirurgicznego leczenia ran, usuwanie ciał obcych - swobodnie leżące fragmenty kości, metalowe ciała obce (fragmenty łusek, kul, śrut itp.).

3. Zapobieganie ropnym powikłaniom rany: skrupulatne przestrzeganie zasad aseptyki i antyseptyki podczas operacji, leczenie przeciwbakteryjne.

4. Drenaż ran, ubytków z uwzględnieniem topografii naczyń w celu zapobieżenia powstawaniu odleżyn ich ścian, nadżerek.

5. Badanie stanu układu krzepnięcia krwi i układu przeciwzakrzepowego pacjenta przed każdą planowaną operacją: czas krzepnięcia, czas krwawienia, poziom protrombiny, liczba płytek krwi.

6. Uważne monitorowanie pacjentów, którzy przeszli operację, w celu szybkiego wykrycia wtórnego krwawienia. Personel medyczny powinien być świadomy klinicznych objawów wtórnego krwawienia i jego ryzyka dla życia pacjenta. Objawy takie obejmują plamienie bandaża krwią, narastające osłabienie, bladość skóry, częste tętno, słabe wypełnienie, spadek ciśnienia krwi.

Laboratoryjne i instrumentalne metody diagnostyki krwawień wewnętrznych.

UAC: erytrocyty, hemoglobina, hematokryt

Specjalne metody diagnostyczne

Wśród specjalnych metod badawczych służących do diagnozowania krwawień najważniejsze są:

• USG, RTG, CT, rezonans magnetyczny (MRI).

Należy zauważyć, że należy je stosować w przypadkach, gdy rozpoznanie krwawienia nie jest jasne lub konieczne jest wyjaśnienie jego charakteru; może to wpłynąć na taktykę leczenia. Jeśli diagnoza jest jasna, a taktyka jednoznaczna, musisz wcześniej zacząć pomagać pacjentowi.

W przypadku wielu utajonych krwawień wewnętrznych stosuje się nakłucia diagnostyczne. Nakłucie jamy opłucnej - w przypadku podejrzenia krwotoku, nakłucie stawu - w przypadku podejrzenia krwotoku, nakłucie jamy brzusznej (lub laparocentezy) - w przypadku podejrzenia hemoperitoneum, nakłucie lędźwiowe - w celu rozpoznania krwotoku śródczaszkowego i krwiaków, nakłucie tylnego rozwidlenia pochwy - w przypadku podejrzenia pęknięcia tylnego sklepienia pochwy jajnik lub jajowód w ciąży pozamacicznej. Nakłucia służą również do diagnostyki krwiaków w tkankach miękkich, które wykonuje się za pomocą igły i strzykawki. Po wprowadzeniu igły do ​​odpowiedniego wgłębienia tłok strzykawki jest odciągany do siebie. Pojawienie się krwi w strzykawce potwierdza rozpoznanie krwawienia. W hemoperitoneum zamiast nakłucia igłą wprowadza się cienką rurkę drenażową przez trokar (laparocenteza), co zmniejsza prawdopodobieństwo uszkodzenia narządów wewnętrznych,

W diagnostyce krwawień wewnętrznych niezbędne są metody endoskopowe. Podczas krwawienia do światła przewodu pokarmowego wykonuje się ezofagogastroduodenoskopię lub kolonoskopię, z krwiomoczem - cystoskopią, z hemartrozą - artroskopią, krwawieniem do jamy brzusznej lub klatki piersiowej - odpowiednio laparoskopią lub torakoskopią.

Angiografia to dość złożone badanie. Stosuje się go w przypadku słabej utraty krwi, niejasnej lokalizacji i natury.

uszkodzenie statku. Tak więc w przypadku krwiaka zaotrzewnowego można wykonać aortografię. Istnieje wiele krwawień, które są bardzo trudne do zdiagnozowania bez angiografii (na przykład krwawienie z tętniaka ściany żołądka lub dwunastnicy do ich światła).

USG, RTG, CT, MRI. Wszystkie te metody pozwalają określić lokalizację krwawienia, ilość utraty krwi. Tak więc w przypadku hemothorax rozpoznanie można postawić za pomocą zwykłego zdjęcia radiologicznego, z hemoperitoneum - za pomocą USG narządów jamy brzusznej, krwiaki i krwotoki w jamie czaszki są dobrze zdiagnozowane za pomocą echolokacji, TK, MRI.

Sposoby tymczasowego zatrzymania krwawienia. Zasady nakładania uprzęży.

Maksymalne zgięcie kończyny

Metoda jest skuteczna w przypadku krwawienia z naczyń uda (maksymalne zgięcie w stawie biodrowym), podudzia i stopy (maksymalne zgięcie w stawie kolanowym), dłoni i przedramienia (maksymalne zgięcie w stawie łokciowym) (ryc. 5-6).

Maksymalne zgięcie kończyny stosuje się w przypadku krwawienia z tętnic, jak również w przypadku masywnego krwawienia z ran kończyn. Metoda jest mniej niezawodna niż użycie opaski uciskowej (patrz poniżej), ale jednocześnie jest mniej traumatyczna. Maksymalne zgięcie w stawie łokciowym jest często używane do zatrzymania krwawienia po nakłuciu żyły łokciowej (wlew dożylny, pobieranie krwi do badań).

Podniesiona pozycja kończyn

Metoda jest niezwykle prosta - konieczne jest podniesienie kontuzjowanej kończyny. Stosowany przy krwawieniach żylnych lub włośniczkowych, zwłaszcza z ran kończyn dolnych.

Wskazania dotyczące bandaży ciśnieniowych

Bandaż uciskowy stosuje się w przypadku umiarkowanego krwawienia z małych naczyń, krwawienia żylnego lub włośniczkowego. Ta metoda jest metodą z wyboru w przypadku krwawienia z żylaków kończyn dolnych. Na ranę można założyć bandaż uciskowy, aby zapobiec krwawieniu we wczesnym okresie pooperacyjnym (po flebektomii, sektorowej resekcji gruczołu mlekowego, mastektomii itp.). Aby zastosować tę prostą metodę, potrzebujesz tylko opatrunku.

Na ranę nakłada się kilka sterylnych serwetek (czasami na wierzchu tworzy się wałek) i mocno bandażuje. Przed nałożeniem bandaża na kończynę należy ustawić ją w podwyższonej pozycji. Bandaż należy nakładać od obrzeża do środka.

Nacisk palcem na tętnice

Jest to dość prosta metoda, która nie wymaga żadnych elementów pomocniczych. Jego główną zaletą jest jak najszybsze wykonanie, wadą jest wydajność tylko przez 10-15 minut, tj. krótki czas trwania.

Wskazaniem do cyfrowego ucisku tętnic jest tętnicze lub masywne krwawienie z odpowiedniego naczynia tętniczego. Metoda jest ważna w sytuacjach nagłych, aby przygotować się do zastosowania innej metody hemostazy, np. Założenie opaski uciskowej.

Na podstawie materiałów ze studfiles.net

Antygeny osocza (surowicy) to specyficzne kompleksy aminokwasów lub węglowodanów na powierzchni cząsteczek białek osocza (surowicy).

GRUPA KRWI to połączenie normalnych immunologicznych i genetycznych cech krwi, która jest dziedzicznie określona i stanowi biologiczną właściwość każdego osobnika.

Grupy krwi są dziedziczone, tworzą się po 3-4 miesiącach rozwoju wewnątrzmacicznego i pozostają niezmienione przez całe życie. Uważa się, że grupa krwi u ludzi obejmuje kilkadziesiąt antygenów w różnych kombinacjach. Te kombinacje - grupy krwi - mogą w rzeczywistości wynosić kilka miliardów. Są praktycznie takie same tylko u identycznych bliźniaków o tym samym genotypie..

W medycynie praktycznej termin „grupa krwi” z reguły odzwierciedla połączenie antygenów erytrocytów układu ABO i czynnika Rh oraz odpowiednich przeciwciał w surowicy krwi.

Dla każdego znanego antygenu znaleziono przeciwciała o tej samej nazwie (anty-A, anty-B, przeciw rezus, anty-Kell, itp.). Grupowe przeciwciała krwi nie są tak stałą właściwością ludzkiego ciała jak antygeny. Jedynie w układzie grupy ABO przeciwciała są normalną wrodzoną właściwością osocza krwi. Te przeciwciała (aglutyniny a i b) są stale obecne w ludzkim osoczu krwi..

Termin „zgodność” oznacza połączenie krwi dawcy i biorcy dla antygenów i przeciwciał, które nie powoduje interakcji immunologicznych.

W zależności od obecności w erytrocytach aglutynogenów A i B oraz w surowicy odpowiednich aglutynin a i b, wszyscy ludzie są podzieleni na cztery grupy:

• Grupa O (I) - nie ma aglutynogenów w erytrocytach, aglutyniny a i b w surowicy.

• Grupa A (II) - aglutynogen A w erytrocytach, aglutynina b w surowicy.

• Grupa B (III) - aglutynogen B w erytrocytach, aglutynina a w surowicy.

• Grupa AB (IV) - aglutynogeny A i B w erytrocytach, brak aglutynin w surowicy.

Antygen A nie jest jednorodny, istnieją dwa główne podtypy: W związku z tym grupa A (II) ma dwie podgrupy A (P) i A2 (II) i grupa AB (IV) - AB (IV) i A2B (IV).

Antygen grupy B jest bardziej jednorodny, chociaż opisano rzadkie warianty. Nie ma to jednak znaczącego znaczenia klinicznego..

Grupę krwi według systemu ABO określa się za pomocą reakcji aglutynacji. Obecnie do określania grup krwi według systemu ABO stosuje się trzy metody:

• zgodnie ze standardowymi surowicami izohemaglutynującymi,

• zgodnie ze standardowymi surowicami izohemaglutynującymi i standardowymi erytrocytami (metoda krzyżowa),

• przy użyciu przeciwciał monoklonalnych (tsoliclony anty-A i aiti-B).

Podczas rutynowego badania lekarz szpitala określa grupę krwi za pomocą standardowych surowic izohemaglutynujących lub za pomocą tsoliclonów, po czym przesyła krew do laboratorium serologicznego w celu sprawdzenia grupy metodą krzyżową.

Grupę krwi uważa się za określoną tylko wtedy, gdy laboratorium potwierdzi dane uzyskane przez lekarza szpitalnego. Jeżeli wyniki badań różnią się od siebie, oba badania należy powtórzyć..

W nagłych wypadkach (w przypadku krwawienia wymagana jest pilna transfuzja krwi), lekarz szpitalny sam określa grupę (w laboratorium przeprowadza się ponowne sprawdzenie, ale po fakcie).

OZNACZANIE GRUP KRWI STANDARDOWYM SERUMEM IZOGEMAGLUTYNUJĄCYM

Najczęściej w praktyce klinicznej i laboratoryjnej.

Istotą metody jest wykrycie antygenów grupy A i B w badanej krwi przy użyciu standardowych surowic izohemaglutynujących. Wykonywane w pomieszczeniu z dobrym oświetleniem w temperaturze 15-25 ° С.

• Standardowe surowice izohemaglutynujące z grup O (I), A (II), B (III) i AB (IV) w dwóch różnych seriach. Serum powinno być przezroczyste, bez śladów próchnicy. Dla wygody standardowe surowice hemaglutynujące z różnych grup są zabarwione na określony kolor: O (I) - bezbarwny (szary), A (II) - niebieski, B (III) - czerwony, AB (IV) - jasnożółty. Należy zauważyć, że te kolory towarzyszą wszystkim etykietom na produktach krwiopochodnych, które mają przynależność do grupy (krew, masa erytrocytów, osocze itp.).

• Białe płytki porcelanowe lub emaliowane lub inne płytki o zwilżonej powierzchni, oznaczone 0 (1), A (P), H (W), AB (IV).

• Izotoniczny roztwór chlorku sodu.

• Igły, pipety, szklane pręty (szkiełka).

b) Technika reakcji

1. Na płytkę (płytkę) nanieść standardowe surowice izohemaglutynujące z grup I, II, III w objętości 0,1 ml (jedna duża kropla o średnicy około 1 cm). Aby uniknąć błędów, stosuje się dwie serie surowic z każdej grupy. Łącznie 6 kropli.

2. Sześć kropli krwi testowej o wielkości zbliżonej do główki szpilki 0,01 ml (mała kropla) jest kolejno przenoszonych suchym pręcikiem szklanym na płytkę w 6 punktach, każda obok kropli standardowej surowicy (ilość badanej krwi powinna być około 10 razy mniejsza niż ilość standardowej surowicy ), a następnie delikatnie wymieszaj je szklanymi prętami o zaokrąglonych krawędziach.

3. Po wymieszaniu talerz jest okresowo kołysany..

Aglutynacja rozpoczyna się w ciągu pierwszych 10-30 sekund.

4. Do kropli, w których wystąpiła aglutynacja, dodać jedną kroplę izotonicznego roztworu chlorku sodu, po czym ocenia się wynik reakcji..

Przy pozytywnej reakcji, zwykle w ciągu pierwszych 10-30 sekund, w mieszaninie pojawiają się małe czerwone ziarenka (aglutynaty), składające się z sklejonych czerwonych krwinek, widoczne gołym okiem.

Jeśli surowice wszystkich trzech grup są pozytywne, oznacza to, że badana krew zawiera oba aglutynogeny - A i B i należy do grupy AB (IV). Jednak w takich przypadkach, aby wykluczyć niespecyficzną reakcję aglutynacji (zimna aglutynacja, pangglutynacja, alergia) konieczne jest przeprowadzenie dodatkowego badania kontrolnego badanej krwi standardową surowicą izohemaglutynującą z grupy AB (IV), która nie zawiera aglutynin. Dopiero brak aglutynacji w tym spadku w obecności aglutynacji w kroplach zawierających standardowe surowice z grup 0 (1), A (II) i B (III) pozwala uznać reakcję za specyficzną i skierować badaną krew do grupy AB0 (IV).

Należy zauważyć, że w przypadku obecności słabego podtypu antygenu A we krwi badanej, reakcja aglutynacji z surowicami hemaglutynującymi z grupy 0 (1) i B (III) rozpoczyna się później (po 3-4 minutach). Aby dokładnie określić podtyp antygenu A, konieczne jest przeprowadzenie dodatkowej reakcji z tzw. Odczynnikiem anty-A.

OZNACZANIE GRUP KRWI WEDŁUG STANDARDOWEGO SUROWICY ISOGEMAGLUTYNUJĄCEJ I STANDARDOWYCH ERYTRYCYTÓW (METODA KRZYŻOWA)

Metodę najczęściej stosuje się w laboratoriach serologicznych. Istota metody polega na określeniu obecności lub braku antygenów grupowych A i B w badanej krwi przy użyciu standardowych surowic izohemaglutynujących, a także przeciwciał grupowych a i b przy użyciu standardowych erytrocytów.

• Wyposażenie do reakcji ze standardowymi erytrocytami różni się tym, że reakcja aglutynacji wymaga standardowych erytrocytów z trzech grup krwi: 0 (1), A (II), B (III).

• Standardowe erytrocyty przygotowywane są z krwi dawców o znanej wcześniej grupie krwi, przechowywane w temperaturze 4-8 ° C.

Na oznaczoną płytkę z pipetą w sześciu komórkach nanosi się jedną dużą kroplę surowicy krwi badanej z probówki (0,1 ml), a obok nich jedną małą kroplę (0,01 ml) standardowych erytrocytów z grupy 0 (1), A (P) H (W) (dwie serie).

Cechą interpretacji wyników reakcji ze standardowymi erytrocytami jest to, że erytrocyty z grupy 0 (1) są kontrolne (nie mają antygenów, co zasadniczo uniemożliwia specyficzną reakcję aglutynacji z jakąkolwiek surowicą).

OZNACZANIE GRUP KRWI PRZEZ PRZECIWCIAŁO MONOKLONALNE

Do określenia grupy krwi stosuje się przeciwciała monoklonalne, do których stosuje się biotechnologię hybrydomy.

Hybrydom jest hybrydą komórkową utworzoną przez fuzję komórki nowotworowej szpiku kostnego (szpiczaka) z limfocytem odpornościowym, który syntetyzuje specyficzne przeciwciała monoklonalne. Hybrydoma nabywa właściwości obojga „rodziców”: zdolność do nieograniczonego wzrostu, charakterystyczną dla komórki nowotworowej, oraz zdolność do syntezy przeciwciał nieodłączną dla limfocytów odpornościowych.

Opracowano standardowe odczynniki - przeciwciała monoklonalne (MCA): tsoliclony anty-A i anty-B, które służą do oznaczania aglutynogenów erytrocytów. Cyklony to liofilizowany proszek koloru czerwonego (anty-A) lub niebieskiego (anty-B), który rozcieńcza się izotonicznym roztworem chlorku sodu bezpośrednio przed badaniem.

Cyklony anty-A i anty-B nanosi się na białą płytkę w jednej dużej kropli (0,1 ml) pod odpowiednimi etykietami: anty-A lub anty-B. Jedną małą kroplę (0,01 ml) badanej krwi nanosi się obok kropli przeciwciał. Po zmieszaniu składników obserwuje się reakcję aglutynacji przez 2-3 minuty..

W 1940 roku K. Landsteiner i A.S. Wiener odkryli w ludzkich erytrocytach zupełnie nowy antygen, który nazwali czynnikiem Rh (Rh). Czynnik Rh jest obecny we krwi 85% ludzi, a 15% ludzi nie zawiera tego czynnika. Nazwa pochodzi od małpy rezus, która zawsze ją ma.

Antygeny rezusa są klasyfikowane jako lipoproteiny. Są bardzo aktywne i zdolne do indukowania tworzenia przeciwciał immunologicznych.

Obecność antygenu Rh jest wykrywana u płodu ludzkiego od 5-8 tygodnia i jest dobrze wyrażana w 3-4 miesięcznym zarodku.